姜黄素和Pantoea vagans菌防治猕猴桃青霉病的作用研究

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扩展青霉(Penicillium expansum)是猕猴桃采后软腐病的优势菌,因此研究开发能够抑制Pen.expansum的抑菌剂是十分重要的。本研究从柑橘、苹果、葡萄表面分离出对Pen.expansum有拮抗作用的细菌,并通过形态学和分子生物学鉴定的方法,确定Pen.expansum拮抗菌分别是Pantoea vagans菌、Erwinia persicina菌和Weissella cibaria菌,其中,Pan.vagans对Pen.expansum的抑制效果最佳。姜黄素是一种天然酚类化合物,具有广泛的抗真菌作用。本研究从姜黄素和分离鉴定的Pan.vagans菌两方面入手,探究二者对引起猕猴桃腐烂的Pen.expansum的抑制作用,为果蔬采后保鲜剂的开发提供了理论基础,具有重要的研究价值和应用前景。本研究主要评价了姜黄素和Pan.vagans菌对猕猴桃采后青霉病的抑制作用,分析了姜黄素和Pan.vagans菌对Pen.expansum的孢子萌发、芽管长度、菌丝生长和产孢的影响。研究了姜黄素对Pen.expansum菌丝中的活性氧(ROS),相关抗氧化物酶过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等酶活情况,以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对菌丝的影响。同时体外研究Pan.vagans菌对Pen.expansum菌丝穿透力、细胞膜通透性、细胞膜麦角甾醇含量以及麦角甾醇合成基因的表达情况,分析姜黄素和Pan.vagans菌对青霉病的抑制机理。本研究结果表明,姜黄素和Pan.vagans菌均对猕猴桃采后青霉病有显著的抑制作用。体外试验结果表明,600 mg/mL姜黄素和Pan.vagans菌对Pen.expansum的孢子萌发抑制分别降至60.04%和65.56%、芽管长度则分别下降72.79%和73.24%,以及对Pen.expansum菌丝生长有抑制作用,促进Pen.expansum逆境产孢。此外分别探究了姜黄素和Pan.vagans菌的抑菌机理,研究发现姜黄素诱导菌丝产生ROS,加速细胞死亡。并且姜黄素处理后的菌丝中抗氧化物酶,包括CAT、POD、SOD和GSH-PX的活性增加。研究表明NAC可部分恢复菌丝生长,这一结果说明ROS的积累是抑制Pen.expansum生长的原因之一。Pan.vagans菌发酵液能够降低菌丝细胞壁中麦角甾醇含量,破坏细胞膜的完整性,同时抑制菌丝细胞膜中麦角甾醇的生物合成和相关基因Pe Ergc的表达水平,降低菌丝穿透能力,结果表明Pan.vagans菌对Pen.expansum的抑制是通过抑制细胞中麦角甾醇的生物合成抑制Pen.expansum的。
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