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黄曲霉毒素（Aflatoxin，简称AF）是真菌的次级代谢产物，主要由黄曲霉、寄生曲霉和特曲霉产生，广泛存在于花生、棉籽、玉米、小麦和稻米等农产品中。因AF具有强烈的毒性和致癌性，1993年AF被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物。AF是一类结构类似化合物，已经分离鉴定出黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，简称AFB1）、B2、G1、G2、M1、M2等二十余种，其中以AFB1毒性最强。为了防止AFB1含量超标的农产品进入人类食物链，许多国家已经制定了农产品中AFB1的限量标准。因此，建立一种快速检测AFB1的方法具有重要意义。 本论文研究的内容主要包括以下两个方面： 1 AFB1胶体金免疫层析快速检测方法的研究 （1） 利用辛酸-硫酸铵盐析法纯化小鼠腹水中抗AFB1单克隆抗体，分别采取间接非竞争ELISA和SDS-PAGE对纯化后抗体的活性和纯度进行鉴定。结果显示抗体和腹水效价分别为1∶1.0×106和1∶2.0x106，SDS-PAGE图谱显示两条带，分别为抗体的重链和轻链。 （2） 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金。胶体金标记抗体经纯化后，使用XYZ3000点喷平台系统将金标抗体喷在玻璃纤维膜上；将AFB1-BSA（检测线）和驴抗鼠IgG（质控线）分别喷在硝酸纤维素膜（Nitrocellulose membrane，NCM）上，检测线和质控线两者之间相距4mm。干燥后依次将NCM、玻璃纤维（胶金垫）、样本垫、滤纸、吸水纸粘贴在胶板上，使用Biodot CM4000切刀切成4mm×55mm的试纸条，装入检测卡中密封保存。 （3） 通过单因素实验确定了试纸条的工艺参数，具体如下：胶体金粒径为40nm，胶体金标记抗体量为0.5μg／mL，胶体金标记抗体纯化后稀释至OD值为6.0，NCM型号为CN140，NCM上包被AFB1-BSA和驴抗鼠IgG的浓度分别为0.3mg／mL、0.5 mg／mL。 （4） 由上述条件组装的AFB1试纸条最低检测限为5ng／mL，与赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、桔霉素、展青霉毒素无交叉反应，重复性为98％。根据试纸条行业经验推算，试纸条在4℃可保存15个月。 （5） 分别用AFB1试纸条和ELISA方法检测11份样品中AFB1的含量，用甲