【摘 要】
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该试验用EcoR I、Xba I两种限制性内切酶对pH55进行酶切分析,获得了11个pH55的 亚克隆.对这些亚克隆进行正反向测序并利用渐排列的寡核苷酸进行定向测序,得到了pH55全长序列.
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该试验用EcoR I、Xba I两种限制性内切酶对pH55进行酶切分析,获得了11个pH55的 亚克隆.对这些亚克隆进行正反向测序并利用渐排列的寡核苷酸进行定向测序,得到了pH55全长序列.同源性分析表明启动区序列与已知的两段序列同源性分别为99.5﹪和99.4﹪.对序列进行的分析提示了多个潜在的转录调控元件,包括两个糖皮质激素应答元件,五个雌激素应答元件,九个cAMP应答元件和九个STAT结合位点.进一步的分析表明,乳铁蛋白基因转录起始位点上游的9.3kb有两个区域调控元件比较集中.第一个区域包括三个雌激素应答元 件,一个糖皮质激素应答元件,一个cAMP应答元件和一个STAT结合位点,第二个区域包括两个雌激素应答元件,一个糖皮质激素应答元件,四个cAMP应答元件和两个STAT结合位点.在这两个区域中雌激素应答元件可被分为两族,第簇500-600bp附近均有一个糖皮质激素应答 元件.由于乳蛋白的产生需要这两种激素分泌的同时增加,因此推测糖皮质激素受体和雌激素受体以及雌激素受体之间可能存在相互作用,以启动乳铁蛋白的表达.引外还发现一个热休克应答元件和多个AP1结合位点和Sp1结合位点.根据序列结果,研究人员绘制了乳铁蛋白基因5区的详细酶切图谱.这一工作为使用这一乳腺特异性表达的启动区结构提供了条件,并为进一步研究乳铁蛋白基因表达的调节奠定了基础.
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