多系统萎缩动物模型建立及光感基因对模型小鼠大脑M1区干预

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本课题研究采用3-NP和MPTP两种神经毒素通过腹腔注射建立P型多系统萎缩小鼠模型,并通过半定量行为学、滚筒测试、爬杆测试确定建立的模型小鼠具备P型多系统萎缩的运动障碍,并使用GFAP、TH两种抗体通过免疫荧光组化染色证实模型小鼠成功复制了P型多系统萎缩的病理特征即黑质-纹状体变性,从而证明了系统毒素给药可以成功的建立了P型多系统萎缩小鼠模型,模型成功的建立为发病机制的研究、评估治疗手段提供了研究平台。在成功建立P型多系统萎缩模型的基础上,由腺病毒作为载体,CaMKIIa作为启动子,将荧光蛋白ChR2和NpHR以PAAV5-CaMKIIa::ChR2(H134R)-mCherry、PAAV5-CaMKIIa::NpHR(H134R)-mCherry的形式导入模型小鼠的M1区,并使用免疫荧光组化染色确定荧光蛋白在M1区表达,然后利用光感基因调控技术分别光照植入的荧光蛋白ChR2和NpHR,从而分别兴奋和抑制动物模型的M1区并同时对模型小鼠进行滚筒测试,记录模型小鼠光照前后的行为学变化,以进一步明确M1区为治疗多系统萎缩的有效靶点,光感基因神经调控技术为有效的治疗手段。
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