【摘 要】
:
目的:应用基因工程方法构建抗人宫颈癌ScFv基因进行ScFv基因的原核表达,为制备其他基因工程抗体和宫颈癌早期诊断和早期治疗打下基础.方法:①采用RT-PCR方法、反向PCR和PCR方
论文部分内容阅读
目的:应用基因工程方法构建抗人宫颈癌ScFv基因进行ScFv基因的原核表达,为制备其他基因工程抗体和宫颈癌早期诊断和早期治疗打下基础.方法:①采用RT-PCR方法、反向PCR和PCR方法扩增抗人宫颈癌抗体V<,L>、V<,H>基因片段.②构建抗人宫颈癌ScFv基因,并将ScFv基因插入到克隆载体PMD18-T和表达载体pCANTAB 5E中,进行测序鉴定.③将带有抗人宫颈癌ScFv外源基因的表达载体pCANTAB 5E分别转化到TG1和HB2151两个原核表达体系中,对转化细胞HB2151进行诱导表达,使其表达可溶性ScFv;对转化细胞TG1用M13K07辅助噬菌体进行援救,使其产生噬菌体展示性ScFv.④对表达的抗人宫颈癌可溶性ScFv和噬菌体展示性ScFv进行检测.⑤优化可溶性ScFv和噬菌体ScFv的表达条件并用SAS对产物初步纯化.结论:①利用反向PCR技术可以增V<,H>基因,避免简并碱基的出现,保证ScFv在基因构建过程中的准确性和稳定性,是扩增同源性差、复杂的未知基因的一个较好方法;②重叠延伸拼接PCR法,能相对准确的扩增出ScFv基因,可以减少错配机会,并节约成本.③经TG1表达体系产生的噬菌体展示性ScFv能自然折叠,有较好的亲和力.④经HB2151表达体系产生的可溶性ScFv,不需要体外进行复性、折叠,就有抗体亲和活性.该研究的结果为进一步构建双特异性ScFv和双功能ScFv基因创造了条件,提供了利用ScFv进行动物实验和体外实验的材料,为人宫颈癌是早期诊断和特异性治疗打下了基础.
其他文献
目的:人附睾蛋白4(HE4)基因最早是在人附睾上皮细胞中发现的,目前已逐渐应用于卵巢癌的早期诊断与鉴别诊断。本研究拟通过免疫组化法检测卵巢上皮性癌组织中HE4的表达,探讨其与
以目前中等职业学校专业课程改革作为切入口,借鉴高等院校精品课程建设成功的经验,立足旅游类专业的实际,通过到企业调研了解地方经济发展对人才的需求,深入探讨中职学校精品课程
摘 要新课导入是课堂教学的重要环节,主要起着集中注意、稳定情绪和进入教学情境的作用。新课导入方法方式是灵活多样的,列举三个新课导入的设计与实践案例,并进行教学实践反思。 关键词新课导入;设计;实践;反思 中图分类号:A,F213.2,B013 文献标识码:A 文章编号:1002-7661(2019)01-0128-02 课堂教学是开展教学活动的主阵地,其效率的高低影响学生知识技能的掌握与能力
我国是全球食管癌高发地区,河南省是我国食管癌高发地区。食管癌发病率高,且以各项身体机能普遍较差的老年人居多。由于年龄的增加,呼吸功能退化,麻醉及手术创伤的影响,导致老年患
摘 要我国大部分高中数学课堂教学越来越注重数学思想方法的渗透,借助数学思想,可以使学生们在掌握数学思想方法的基础上更好地理解并应用数学理论知识,进而实现了数学理论学习与数学思想学习的结合。本文从了解高中数学课堂教学中重要数学思想入手,探讨高中课堂中渗透数学思想的教学方法。 关键词高中数学;数学思想;课堂教学策略 中图分类号:G632 文献标识码:A 文章编号:1002-7661(2019)01
研究背景: 精神分裂症(Schizophrenia,SZ)是一组病因未明、致残率高、复发率高的常见的精神障碍。既往的研究表明,SZ患者社会功能常常受到损害,且与精神症状的严重程度相关联。
空间,作为肉身休憩之处,使得日夜游离的魂魄得以萦绕相对。楼宇之于人,如飞鸟落足的枝丫,有的会遮荫,有的会风动,有的与雨游嬉,总有几分相映的趣味在其中。房舍与人,树枝与
硼、钼是植物正常生长发育不可缺少和不可代替的微量元素。大量实践证明:硼、钼对豆科、十字花科植物都有明显的增产作用。但在豆科蔬菜方面还很少报道。为了探索硼、钼微量
本文通过观察法对集体教学活动中师幼互动的实际案例进行分析,并基于“平视儿童”的角度提出,集体教学活动中有效的师幼互动主要通过“平视幼儿的主体性”、“平视幼儿的话语
摘要:“教是为了不教”就是要教会学生学习,反映到语文教学上,就是培养学生的语文自学能力;中职语文教学要从转变观念、激发兴趣、教授方法、指导训练、养成习惯等五个方面入手,培养语文自学能力,提高语文素养,促进学生职业生涯的发展。 关键词:中职教育;语文教学;自学能力培养 如何适应职业教育以能力为中心,以就业为导向的教育教学目标,进行语文教育教学改革,一直是中等职业学校在努力探究的一个重要课题。虽然