抗人CCL22以及CCL17免疫毒素的表达纯化与体外功能验证

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shi12345600
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:利用巴斯德毕赤酵母来表达抗人的CCL22以及CCL17免疫毒素,得到它们的单价以及双价免疫毒素,进行体外的功能验证以及单双价免疫毒素功能比较。方法:本试验利用毕赤酵母来生产抗人CCL22以及CCL17的单价和双价免疫毒素,需要经过两步纯化,第一步为镍柱纯化,第二步为离子柱纯化。利用SDS-PAGE凝胶电泳检测所得到免疫毒素分子量,最终Western Blot进一步鉴定蛋白。得到目的蛋白后,使用NHS-Sulfo生物素对其进行标记,以供流式细胞仪检测其与CCRF-CEM肿瘤细胞系的结合能力;使用3H同位素标记亮氨酸的方式检测两种单价免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞蛋白质合成的抑制能力;使用CellTiter-Glo试剂盒侦测CCRF-CEM肿瘤细胞中的ATP含量,来检测免疫毒素对其增殖的抑制作用。结果:本试验通过毕赤酵母成功表达了四种免疫毒素,即Anti-human CCL22单双价免疫毒素以及Anti-human CCL17单双价免疫毒素。这四种免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞均具有粘附能力,且双价免疫毒素的粘附能力大于单价免疫毒素;Anti-human CCL22及Anti-human CCL17的单价免疫毒素均能抑制CCRF-CEM肿瘤细胞蛋白质合成,且后者的抑制能力强于前者;所有免疫毒素对CCRF-CEM肿瘤细胞活力均具有抑制作用,且双价体的效力大于单价体。结论:本试验成功表达了抗人的CCL22以及CCL17的单价及双价共计四种免疫毒素,它们对于CCRF-CEM肿瘤细胞均具有粘附及增殖抑制作用,其中双价免疫毒素效果较为明显,这些结果可以为日后的癌症与肿瘤治疗提供一定的理论基础。
其他文献
目的:对激素非依赖性前列腺癌(AIPC)患者的预后相关资料进行回顾性分析,探究多种因素与AIPC患者的预后之间是否存在有相关性。方法:收集并整理2005年6月至2015年12月期间弋矶
柔性吊桥所具有的特点使其更适用于经济水平相对落后、交通量相对较小、荷载等级相对低的地地区,因此我国西南山区对柔性吊桥的采用十分广泛。柔性吊桥作为悬索桥中的一种,以
本文通过分析众筹出版的商业模式以及特点,对众筹出版的现状进行了研究,在此基础上得出众筹出版目前仍存在法律制度建设与知识产权归属、延长产业链建设以及提高众筹出版专业
研究目的睾丸肿瘤是常见的恶性肿瘤之一,常发生于15~35岁男性青年。近几十年,随着医学科技的飞速发展,通过综合的治疗方案,睾丸肿瘤可达到90%以上总体生存率。19世纪晚期,睾
在西方经济学中存在劳动者主体地位的弱化现象,认为劳动者是孤立的经济人或者生产要素。在马克思劳资关系理论中,研究劳资关系主体时利用了社会的、具体的人作为研究对象,并且分
随着我国市场经济的迅速发展,中小企业要想在激烈的市场竞争中明确发展方向,并占有一席之地,就必须为企业财务管理营造一个稳定安全的发展环境,明确财务管理对于企业发展的重
本文研究并分析了靶向药物舒尼替尼、索拉菲尼作为肾细胞癌的新辅助药物在后期根治性切除手术的可行性和安全性。选择了50例由于进展期肿瘤或转移性原因而无法进行原发灶切除
公安高校大学生是我国公安事业的重要后备力量,担负着维护国家长治久安和人民安居乐业的神圣职责。党和人民历来对警察的思想品格、职业操守寄予深切期望。在人民警察的价值