研究背景:　　肝细胞肝癌（肝癌）是一种高度恶性的肝脏肿瘤，影响患者预后的主要因素是术后复发。目前microRNA的研究表明其在恶性肿瘤的发生发展中起到重要作用，参与了多条肿瘤相关的信号传导通路，而相关表达谱的研究也提示microRNA可以作为肿瘤诊断、预后评估的分子标记物。本研究拟通过用芯片研究microRNA在不同复发情况的肝癌患者肝癌组织中的差异表达，并研究下游靶基因的功能与参与的信号传导通路。研究肝癌恶性度相关的新microRNA在肝癌组织中的差异表达，探索新microRNA在肝癌发生中的作用机制，寻找肝癌早期复发的标记物。　　另一方面，肝癌异质性较高，肝癌患者对化疗药物的敏感性个体差异较大，而肝癌治疗尚缺乏统一而有效的术后辅助治疗方案，个体化治疗可能提高肝癌患者术后治疗的疗效。目前关于肝癌个体化治疗的研究比较有限。本研究拟通过3D组织细胞培养技术，建立监测肝癌患者化疗药物个体敏感性的实验体系。　　目的:　　发现肝癌复发相关的microRNA。　　发现肝癌预后评估的标记物。　　探索肝癌复发相关的发生机制。　　建立肝癌个体化治疗敏感性检测体系。　　方法:　　研究一:收集肝癌早复发/晚复发患者的肝癌组织样本，运用芯片技术进行分析，寻找差异表达的microRNA，并用定量PCR验证。用差异表达的microRNA对肝癌样本进行聚类分析。用GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析对差异表达的microRNA的下游靶基因进行研究，寻找与肝癌复发相关的异常细胞功能和信号传导通路。通过测序方法获得新的8条与肝癌恶性度相关的microRNA，用定量PCR方法在大样本肝癌患者的配对癌组织/癌旁组织中验证差异表达。　　研究二:收集肝癌患者新鲜手术标本，运用3D组织细胞培养技术，观测不同化疗药物或组合对肝癌组织细胞迁移能力的影响。　　结果:　　研究一:在不同复发情况的15名肝癌患者的肝癌标本中发现了32条差异表达的microRNA，选择其中4条进行定量PCR验证。对肝癌样本进行聚类分析，用差异表达的microRNA可区分肝癌早复发组与晚复发组。运用GO功能富集建立了miRNA与下游靶基因的GO功能网络图，运用KEGG信号通路富集分析获得了肝癌复发相关的microRNA调控的下游靶基因参与的主要信号传导通路。已在两名患者的肝癌标本上对测序获得的新的8条肝癌恶性度相关的microRNA进行验证。　　研究二:共对6名肝癌患者进行了研究，其中3名患者的肝癌组织标本对表柔比星敏感，1名患者的肝癌组织标本对表柔比星和5-氟尿嘧啶均敏感，且两药敏感性具有显著性差异。　　结论:　　研究一:表明在肝癌早复发组与晚复发组的肝癌组织中microRNA表达谱存在差异，相对于晚复发组，在早复发组中miR-29c上调而miR-186、miR-15a、miR-18b下调。microRNA参与黏着斑连接、癌症信号通路和MAPK信号通路中多个靶基因的表达调控，影响肝癌复发。差异表达的microRNA可以用于肝癌患者复发情况的临床分型并提示预后。　　研究二:建立了肝癌组织细胞3D培养实验体系，可为肝癌个体化治疗方案的选择提供依据。实验还需改善实验体系的稳定性和操作流程的可重复性，并扩大样本量进行进一步验证。本实验体系可推广至其他多种化疗药物及组合、放疗、免疫治疗、生物靶向治疗等多种辅助治疗手段的个体敏感性检测。