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目的: 古往今来,人参作为一种稀有珍贵的中药材,质量一直广受人们的关注。据相关文献报道,一方面,人参具有很强的地域性特征,不同区域的人参所含化学成分的含量具有一定的差异性;另一方面,人参作为多年生五加科人参属草本植物,其采收年龄在一定程度上,也严重影响着人参的药材性状。本研究利用高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪(RRLC-Q-TOF MS/MS),对不同产地、不同生长年限人参中的主要皂苷进行定量分析比较。以期为人参的道地性开发利用及其适宜的栽培区域划分提供参考。 方法: 1.人参样品:收集了人参的主产区辽宁省、吉林省、黑龙江省等的13个地区采集不同年限的鲜人参,收集整理待用。 2.人参皂苷的提取方法:采用超声波提取法对人参样品的人参皂苷成分进行提取。 3.分析方法的建立:通过RRLC-Q-TOF MS/MS检测方法对人参样品中的皂苷成分进行稳定性、重现性、精密度、线性及加样回收率的考察,建立人参样品中皂苷含量的测定方法。 4.人参皂苷成分的鉴定:采用Masshunter Qualitative Analysis(B.03.01)软件分析整理实验数据,根据各色谱峰的保留时间、精确分子质量及碎片离子,并参考对比相关文献,鉴定人参含有的皂苷成分。 5.皂苷含量的统计分析和比较:使用RRLC-Q-TOF MS/MS对不同产地、不同生长年限的77份人参样本中的人参皂苷进行检测分析比较。其中,以8种人参皂苷Rg3、Rc、Rg1、Rf、Rb2、Rb1、Re、Rd作为主要的人参皂苷进行比较研究。 结果: 1.分析方法的建立:实验结果表明,本方法的稳定性、重现性、精密度、线性及加样回收率均良好。 2.人参皂苷成分的鉴定:本文采用RRLC-Q-TOF MS/MS的检测方法检测人参中的皂苷成分,共分析了34种人参皂苷。 3.皂苷含量的统计分析和比较:研究结果表明,人参中的总皂苷含量随着生长年限及产地的不同而具有明显的差异性。其中,人参总皂苷含量最高的栽培区域是长白县(19.36 mg/g),而人参皂苷含量最低的栽培区域是鸡东县(12.05 mg/g)。另外,吉林省人参比黑龙江、辽宁两省的人参的人参总皂苷含量较高,尤其是人参皂苷Rb1和Rg1含量相对较高。此外根据其中具有代表性的8种人参皂苷(Rg3、Rc、Rg1、Rf、Rb2、Rb1、Re、Rd)进行含量的统计分析和比较,发现人参皂苷Rg3、Rd和Rb2保持相对稳定,只有极少数的区域略有差异,而其他五种人参皂苷(Rc、Rg1、Rf、Rb1和Re)的含量明显具有区域性差异。而人参皂苷的含量随着人参的生长年限的增加同样具有明显的差异,人参皂苷Re、Rc、Rg1、Rg3、Rf的含量随着培养年龄的增加而增加,而人参皂苷Rb1的含量在培养的第三年达到高峰。 结论: 本实验通过采用香草醛-冰醋酸紫外显色法,对生长年限在2-4年的不同栽培区域的77份人参样品进行了人参总皂苷含量的分析比较。同时,采用RRLC-Q-TOF MS/MS联用技术,对上述的人参样品中的8种人参皂苷(Rg3、Rc、Rg1、Rf、Rb2、Rb1、Re、Rd)进行了的皂苷含量成分的分析。通过结果认为,人参的栽培区域和生长年限对人参总皂苷的含量有显著的影响,且不同区域的人参中单体人参的含量配比有显著的差异。其中,来自吉林省的人参样本中的总皂苷含量水平相对较高,来自黑龙江省的相同参龄的人参中,人参皂苷Re的含量相对较高,而辽宁省的同一生长年限人参中,人参皂苷Rb1和Rg1的含量均相对较高。且根据不同的单体人参皂苷在药理功效方面具有一定的差异性,因此,本研究在为不同地区、不同生长年限的人参中的皂苷含量的变化规律提供科学依据同时,为稀有珍贵的人参中药材的道地性开发利用及其适宜的栽培区域划分提供了参考。采购者可根据此规律,选择相应产区及年限的人参进行预防治疗,这为广大消费者提供了极大的便利。