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目的心肌梗死是一种致死率高、预后差的心血管疾病。减少心肌细胞凋亡是提高心肌梗死患者存活率的关键。环状RNA(circRNA)是一类结构稳定、组织和疾病发展时期特异的分子,在多种疾病的发生发展中发挥着重要作用,而其在心肌细胞凋亡中的作用仍不清楚。本研究旨在探究circRNA在心肌细胞凋亡的作用,进一步明确心肌梗死的分子机制。方法数据库和测序类文献中筛选心肌细胞凋亡相关circRNA,并检测在H2O2(100μM)诱导的H9c2细胞凋亡中表达变化明显的circRNA。用反向引物和正向引物进行聚合酶链式反应,琼脂糖凝胶电泳确定所得产物的特异性和分子量,sanger测序测定反向剪接位点的碱基序列,并用Phylop进行物种间保守性分析。RNase R实验检测circNFIX对RNase R的耐受性,放线菌素D实验检测circRNA的稳定性。用H2O2(100μM)或缺氧诱导心肌细胞凋亡,并测定不同诱导时间下circNFIX的表达量变化;构建小鼠心梗模型,用伊文思蓝染色和Western blot实验验证心肌缺血效果,并检测不同缺血时间circNFIX的表达量变化;转染并验证小干扰RNA(sicircNFIX)对circNFIX的抑制效果,然后检测si-circNFIX对H2O2(100μM)诱导的H9c2细胞凋亡的作用;转染并验证过表达载体(oe-circNFIX)对circ NFIX的过表达效果,然后检测过表达载体对低浓度H2O2(50μM)诱导的H9c2细胞凋亡的作用;TUNEL染色检测si-circNFIX或oe-circNFIX对H9c2细胞凋亡率的影响;Western blot实验检测si-circNFIX或oe-circNFIX对H9c2细胞中bax和bcl-2蛋白水平的影响。结果本研究筛选的circNFIX在H9c2细胞凋亡中表达变化最明显,琼脂糖凝胶电泳显示反向引物PCR产物为单一、特异、分子量相符的条带,sanger测序表明其碱基序列与circBase相符。在人、大鼠、小鼠中circNFIX具有较好的保守性;RNase R实验说明circNFIX可以耐受RNase R的酶切作用;放线菌素D实验显示circ NFIX较线性NFIX稳定,半衰期较长。在H2O2(100μM)或缺氧诱导的H9c2细胞凋亡中,circNFIX的表达量随时间的增加逐渐减少;伊文思蓝染色结果表明缺血手术组左心室缺血面积明显增加,心脏标本Western blot结果表明缺血手术组bax与bcl-2蛋白水平比值明显增加,说明小鼠心梗模型中心肌梗死面积和凋亡水平明显增加;circNFIX的表达量随心肌缺血时间的延长逐渐减少。si-circNFIX可明显抑制circNFIX的表达,oe-circNFIX可显著增加circNFIX的表达;TUNEL染色显示敲低circNFIX可抑制H2O2(100μM)引起的TUNEL阳性细胞率的增加,过表达circNFIX促进低浓度H2O2(50μM)诱导的TUNEL阳性细胞率的增加;细胞标本Western blot结果表明敲低circNFIX可抑制H2O2(100μM)引起的bax/bcl-2比值的增加,过表达circNFIX促进低浓度H2O2(50μM)诱导的bax/bcl-2比值的增加。结论本研究发现circNFIX在心脏中含量丰富,保守性和稳定性好;在心肌细胞或组织凋亡的过程中,circNFIX的表达量逐渐减少;沉默circNFIX可抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡,而过表达circNFIX则增加心肌细胞对凋亡的易感性;证明circNFIX在心肌梗死的发生中具有促凋亡的作用。