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N-乙酰转移酶13(N-acetyltransferase13,NAT13)别名Nα-乙酰转移酶50,是在有丝分裂过程中,染色体分裂时所需要的一种Nα-末端乙酰转移酶,本研究对日本血吸虫NAT13(SjNAT13)在日本血吸虫中的生物学特性及相关功能进行了初步研究。根据GenBank中日本血吸虫NAT13基因的cDNA序列(FN317573.1)设计引物,成功克隆表达了SjNAT13基因,该基因全长为621bp,编码206个氨基酸,重组SjNAT13蛋白(rSjNAT13)分子量大小为27 kDa。利用实时定量PCR技术(Quantitative Real-time PCR,qPCR)分别检测了该基因在虫体不同发育时期及雌、雄虫中的转录水平,结果表明,其在日本血吸虫的不同发育阶段均有转录,在21d虫体中的转录水平最高,14d虫体中的转录水平最低;雌雄虫转录水平比较结果表明,在21d雌雄虫中转录水平相当,17d、24d、28d、35d和42d雄虫中的转录水平显著高于雌虫。分别将rSjNAT13和日本血吸虫42d全虫可溶性蛋白作为检测抗原,以抗rSjNAT13的小鼠血清为一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗小鼠IgG为二抗,进行Western blotting分析,结果显示,rSjNAT13和虫体蛋白可以被制备的抗rSjNAT13血清识别。将rSjNAT13免疫BALB/c小鼠进行免疫保护实验,两次动物保护实验的结果显示,与PBS对照组相比,rSjNAT13实验组在BALB/c小鼠体内分别诱导产生12.30%(P>0.05)和16.36%(P>0.05)的减虫率和24.23%(P<0.05)和24.47%(P<0.05)每条雌虫的肝脏减卵率,该重组蛋白不能够诱导产生较好的减虫效果,但可以减少每对虫体的产卵量。利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测三组小鼠在免疫前后的特异性IgG抗体水平变化,结果显示,rSjNAT13组小鼠在第二次免疫后,体内rSjNAT13特异性IgG抗体水平显著升高,在三免时达到最高,206佐剂组和PBS组在感染前后及剖杀时都没有明显变化。将28d虫体进行免疫组化实验,观察该蛋白在虫体中的分布情况,结果显示,该蛋白在虫体中广泛分布。通过电转法对42d成虫进行体外RNA干扰实验,经qPCR检测及筛选,发现siRNA-514具有较好的干扰效果,利用siRNA-514对42d成虫进行体外RNA干扰后,计算干扰后虫体的减卵率,结果显示,与空白对照组相比,siRNA-514干扰组产生了38.91%(P<0.05)的减卵率;将siRNA-514尾静脉注射感染18d后的BALB/c小鼠,进行体内RNA干扰实验,结果显示,与空白对照组相比,siRNA-514干扰组产生了10.91%(P>0.05)的减虫率和37.66%(P<0.05)的每条雌虫的肝脏减卵率。本研究成功克隆、表达了SjNAT13基因,并对该重组蛋白进行了小鼠免疫保护实验的效果评估,检测了该基因在虫体不同发育阶段、不同性别虫体中的表达情况,并对该基因进行了体外和体内RNA干扰效果进行了评估。本研究为更好地了解SjNAT13的基本特性、探究SjNAT13在日本血吸虫中的生物学功能,特别是对虫体产卵的影响奠定基础。