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Wt1基因，编码一个C末端具有四个锌指结构的核转录因子，早期的研究结果表明，该基因在Denys-Drash syndrome(DDS综合征)的病人中有非常高的突变频率，DDS综合征的患者会出现性别逆转以及性腺发育异常症状。在小鼠胚胎发育第9.5天，Wt1在的生殖脊的间充质细胞中特异表达;随着性腺的分化，Wt1的表达集中在睾丸的Sertoli细胞并持续特异表达到成年，Wt1这种早于其他一些生殖发育相关基因的表达模式，提示Wt1基因处于基因表达调控的上游。 体外分离成年小鼠Wt1+/-; Cre-ERTM的Sertoli cells，利用Tamoxifen诱导对WT1进行细胞特异性的敲除，生物芯片数据以及实时定量PCR结果表明inhibin-α基因的表达明显下调;如果分离原代的Sertoli细胞，进行体外转染Wt1表达质粒，与对照相比，转染Wt1后引起Inhibin-α的表达上调;提示Wt1正向调控inhibin-α的表达。因此在Sertoli细胞中进行Inhibin-α表达调控机制的研究。 接下来利用体外分子生物学和生物化学手段，针对inhibin-α表达调控机制进行相关研究:首先利用Dual-Luciferase Reporter Assey System，发现:Wt1A/Bisforms能特异正调控inhibin-α的表达，而Wt1 C/D isforms则不能。这也与以前报道的Wt1A/B isforms参与调控相关基因表达调控，Wt1C/D isforms主要参与RNA前体的加工，相对应。结合Site mutation和ChIP Assay，发现inhibin-α的promoter上有一段特异的保守序列（-58bp to-49bp）是Wt1的结合位点。同时在Wt1结合位点附近存在一个Sf1（Steroidogenic Factor-1）的结合位点，利用Dual-Luciferase Reporter Assey System，体外共转染Wt1和Sf1，发现:Wt1A/Bisforms能与Sf1协同调控inhibin-α的表达，而Wt1 C/D isforms则不能;并且此协同作用对Wt1而言不具有剂量依赖性。进一步研究表明Wt1和Sf1协同调控Inhibin-α表达的作用能被Wnt pathway增强。Site mutation的结果证实，SF1的ligand binding domain(LBD)中有四个氨基酸(235-238)对于Wt1和Sf1协同调控inhibin-α的表达非常关键，当突变掉这四个氨基酸，Wt1和Sf1不能协同调控inhibin-α的表达。尽管这四个氨基酸对Wt1和Sf1的相互作用并没有影响。相关实验内容在TM4，Hela细胞系都得到一致的结论。 Inhibin-α是Inhibin蛋白的组成性亚基，主要在睾丸，卵巢，垂体，和肾上腺等组织中表达，Inhibin-α的敲除研究表明，在雄性小鼠中的敲除该亚基将造成性腺间质肿瘤，这表明Inhibin在性腺发育中起着重要的作用。先前的研究已经表明，类固醇生成因子1(Sf1)与Wnt信号或cAMP途径协同诱导Inhibin-α的表达。然而，Inhibin-α表达的调控方面是否存在Wnt和cAMP信号通路的cross-talk仍未知。我们发现，cAMP信号通路对SF1和Wnt信号通路协同调控Inhibin-α是至关重要的，cAMP反应元件(CRE)突变，完全消除SF1和Wnt信号通路的协同作用。我们还发现，cAMP信号通路参与Inhibin-α表达的调节是CRE结合蛋白(CREB-1)参与介导的。利用shRNA特异性的Knocking downCREB-1蛋白能去除cAMP信号参与的调节Inhibin-α表达的作用。此外，Sf1的配体结合域(LBD)（氨基酸残基235-238）的突变也影响了Sf1和cAMP信号协同调控Inhibin-α的表达，表明Wnt信号通路还参与了Sf1和cAMP信号通路的协同调控作用。