东、西方蜜蜂肠道菌群定殖规律研究

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:missiyoumiss
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东方蜜蜂(Apis cerana)和西方蜜蜂(Apis mellifera)是我国饲养规模最大的两大商业蜂种,它们不仅能产生丰富的蜂产品带来经济价值,还能为农作物提供授粉服务,是重要且广泛养殖的经济昆虫之一。蜜蜂的健康养殖一直是人们关注的问题。近年来,蜜蜂遭受到各种生物或非生物的胁迫,其健康遭受到了巨大的挑战。研究表明,肠道菌群与宿主的关系密切,它们在宿主的食物代谢、健康、疾病、免疫和发育中都发挥了重要的作用。肠道菌群功能的发挥依赖于肠道菌群的组成结构,而肠道菌群的定殖是组成结构的基础。然而,迄今为止,对我国广泛养殖的两种重要蜜蜂种类的肠道菌群定殖规律还知之甚少。同时,国外研究者发现西方蜜蜂肠道菌群在出房后的第7 d完成定殖。但先前研究报道的工蜂样品采样时间跨度较大,可能会导致一些肠道菌群定殖的重要过程缺失。因此,为更清晰的了解蜜蜂肠道菌群从定殖起始到定殖成型期的变化规律,本研究自工蜂出房后,每12 h采一次样,进行高密度采样直到肠道菌群定殖成功(出房后第156peh,post-emergence-hours,peh)。同时,本研究还以我国饲养量最大的西方蜜蜂和东方蜜蜂为研究对象,采用高通量测序技术从较长的时间尺度对这两种蜜蜂在自然、健康状况下的肠道菌群演替规律进行系统研究,揭示东、西方蜜蜂在同一生态条件下肠道菌群的动态演替规律。其主要结果如下:1基于高密度采样探索西方蜜蜂肠道菌群定殖成型时期的菌群定殖规律研究结果表明:不同peh下,工蜂肠道菌群的多样性各不相同,肠道菌群的多样性在0 peh时最高,在0 peh-24 peh时肠道菌群的变化速率最大,然后趋于稳定。其中,本研究发现在菌群定殖前后,有132个OTU是共有的,表明这132个OTU在蜜蜂肠道内发挥了重要的功能。此外,本研究还发现这些核心菌群的增加伴随着非核心菌群相对丰度的减少,且核心菌群的增加与非核心菌群的减少具有密切的相关性(皮尔逊相关系数=0.891,p<0.01)。2不同发育阶段西方蜜蜂肠道菌群定殖规律通过对0日龄到40日龄等不同发育阶段工蜂肠道菌群的研究结果表明:工蜂肠道内的核心菌群在不同发育阶段下显著不同。其中核心菌群Gilliamella、Frischella和Snodgrassella在1dpe(1 day poste mergence,dpe)显著定殖;Lactobacillus、Bifidobacterium和Commensalibacter在3 dpe显著定殖并伴随Gilliamella丰度的显著下降。Lactobacillus kunkeei和Bartonella在12 dpe显著定殖并伴随Lactobacillus helsingborgensis的显著下降。此外,肠道菌群的多样性随宿主年龄而显著改变。3不同发育阶段下中华蜜蜂肠道菌群的定殖规律通过对不同发育阶段的中华蜜蜂肠道菌群进行深度测序。结果表明:随着宿主年龄的增加,肠道菌群的多样性也显著改变。在门水平上,Proteobacteria(p=0.013)、Firmicutes(p=0.008)及Bacteroidetes(p=0.021)等优势菌群的相对丰度变化显著;在属水平,Lactobacillus(p=0.003)、Gilliamella(p=0.011)、Apibacter(p=0.006)、Bifidobacterium(p=0.026)及Acinetobacter(p=0.005)等细菌属的相对丰度也出现显著变化;此外,基于LEfSe分析(LDE≥4)表明在工蜂发育的早期阶段,环境暴露对肠道菌群的组成影响巨大。在0 dpe和1 dpe中,显著富集的细菌类群较多,随着工蜂的发育,显著富集的细菌类群逐渐减少。
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