论文部分内容阅读
肥胖是一种常见的内分泌性疾病,近年来,在发达及发展中国家均呈上升趋势。肥胖可以导致高血压、糖尿病、心脏病、脑血管病、癌症、胆囊炎、感染等一系列疾病,严重影响了人们的身心健康。肥胖问题的严重性和现有药物疗效的不确切性,亟待寻找全新的药物,用于肥胖症的治疗。葡萄籽含有低聚原花青素等对健康有利的活性物质,大量的研究工作在这个领域开展,如探索葡萄籽中多酚物质的提取及功能研究。Moreno等发现葡萄籽提取物（GSE）富含抑制脂肪酶活性的活性物质,从而可以作为一种安全、自然、经济的减肥食品。本论文研究了GSE在体外对胰脂肪酶的抑制作用;探讨了有机溶剂提取和超声波辅助提取的各种影响因素,并筛选出较佳的工艺条件;研究葡萄籽提取物对营养型肥胖大鼠的减肥作用,探讨其可能的作用机制。葡萄籽粉碎后用95%乙醇提取24h,提取液减压浓缩得乙醇浸膏,乙醇浸膏依次分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取后减压浓缩萃取液并冷冻干燥得相应溶剂提取物。采用猪胰脂肪酶抑制剂活性筛选模型对各组分进行活性筛选。葡萄籽氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提物对脂肪酶抑制的IC50值分别为46.316mg/mL、0.950mg/mL、28.541mg/mL、150.386mg/mL。初步探讨了葡萄籽乙酸乙酯提取物对胰脂肪酶的抑制机理可能为:抑制剂与酶的活性部位结合,使酶的三维结构发生改变,导致酶催化反应速率下降。通过试验测定了抑制常数:Ki=0.94mg/mL。Dixon图和Lineweaver-Burk图的特征表明,该抑制剂对胰脂肪酶的抑制呈非竞争性可逆抑制。以抑制率和得率为指标,采用不同浓度的乙醇作为提取剂,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度和液料比对葡萄籽中脂肪酶抑制剂的得率和抑制率的影响,得到溶剂浸提的最佳工艺条件:乙醇浓度70%、液料比9:1、35℃下提取3h,抑制剂的抑制率和得率较高,抑制率为73.65%,得率为0.72%。运用脉冲超声辅助提取抑制剂的方法,优化得到的最佳工艺参数为:超声功率600W,循环转速15r/s,工作/间歇比为2,提取30min。抑制剂的抑制率和得率较高,抑制率为78.82%,得率为0.79%。与溶剂浸提法相比,超声辅助提取后抑制率提高了7%;得率提高了9.34%,提取时间缩短了83.3%。对膳食诱导的肥胖大鼠灌服葡萄籽提取物（10,30,90mg/kg/d）和奥利斯他（10mg/kg/d）四周后,大鼠摄食量未见减少,但体重显著降低（p＜0.01）,肾周围脂肪重量、脂肪系数及Lee’s指数明显低于肥胖模型组;葡萄籽提取物低剂量组能显著降低大鼠甘油三酯水平。研究结果表明葡萄籽提取物具有减轻体重和改善脂质代谢的作用。