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目的:目前,虽然在运动预适应心脏保护作用机制方面的研究有了很大的突破,但是对停训后EP心脏保护效应的持续时间尚无统一的定论,因此研究旨在探究运动训练停止后,EP诱导的心肌保护效应的时效性。课题从心肌酶学、心电图、心功能、线粒体呼吸功能等不同角度进行EP对力竭大鼠心肌保护效应时效性的探索。以期为战士、运动员等高强度作训人员运动性损伤的防治工作提供新的理论基础和实验依据。方法:1.实验动物分组及模型56只健康雄性SPF级大鼠,将大鼠随机分为7组(n=8):对照组(CON组)、力竭组(EE组)、运动预适应组(EP组)、运动预适应后力竭组(EP+EE组),其中EP+EE组又随机分为1D组、3D组、9D组、18D组,参照Domenech和Lennon等研究建立EP动物模型,进行间歇跑台运动,运动速度为26m/min,运动时间为60min,坡度为5°(运动强度为75%VO2max)。按照先运动15min,再休息5min为一组,在为期60min的运动过程中如此重复3组,进行连续3周的间歇性跑台运动,建立EP动物模型。EP+EE组于EP运动3周停止后第l、3、9、18天以30m/min的速度进行力竭跑台运动,以大鼠连续滞留在跑台的后段,光电声刺激无效为达到力竭标准。2.采用ELISA法检测各组大鼠血清中NT-proBNP、cTnI含量。3.利用PowerLab数据采集及分析系统,记录大鼠心电图。4.应用Millar压力容积导管检测心功能,记录各组大鼠心功能参数:心输出量(CO)、搏出量(SV)、左室收缩末期容积(Ves)、左室舒张末期容积(Ved)、左室舒张末期压力(Ped)、左室收缩末期压力(Pes)、心率(HR)、射血分数(EF)、松弛时间常数(Tau值)、压力上升最大速率(dp/dtmax)、压力下降最大速率(dp/dtmin)左室收缩末期压力容积关系(ESPVR)、左室舒张末期压力容积关系(EDPVR)指标。5.应用高分辨呼吸测定仪检测大鼠心肌线粒体复合物Ⅰ的态3与态4、复合物Ⅱ、复合物Ⅳ的呼吸速率,并分析比较复合物Ⅰ的呼吸速率控制比(Respiratory Control Ratio,RCR)。结果:1.各组大鼠心肌血清指标的比较与CON组相比,各力竭组大鼠血清NT-proBNP、cTn-I的含量均显著升高,有统计学差异(P<0.05),CON组与EP组相比无统计学差异(P>0.05);与EE组相比,1D、3D、9D组大鼠血清NT-proBNP、cTn-I的含量均明显降低,有统计学差异(P<0.05),18D组与EE组相比无统计学差异(P>0.05);1D组与3D组相比无统计学差异(P>0.05);与1D组相比,9D、18D组大鼠血清NT-proBNP的含量明显升高,有统计学差异(P<0.05);与9D组相比,18D组大鼠血清NT-proBNP、cTn-I的含量明显升高,有统计学差异(P<0.05)。2.各组大鼠心电图指标的比较与CON组相比,各力竭组大鼠HR增加、ST段抬高,有统计学差异(P<0.05),CON组与EP组相比无统计学差异(P>0.05);与EE组相比,1D、3D、9D组QRS间期缩短、ST段抬高程度降低,有统计学差异(P<0.05),18D组与EE组比较,HR、QRS间期无统计学差异(P>0.05);1D组与3D组相比无统计学差异(P>0.05),与1D组相比,9D、18D组HR增加、ST段抬高,有统计学差异(P<0.05);与9D组相比,18D组大鼠QRS间期显著延长,有统计学差异(P<0.05)。3.各组大鼠心功能指标的比较与CON组相比,EP组大鼠CO、SV、Pes、ESPVR、dp/dtmax、dp/dtmin的绝对值升高,Ves降低,心功能增强,有统计学差异(P<0.05),与CON组相比,各力竭组大鼠心功能指标降低,尤其EE组与18D组降低最明显,有统计学差异(P<0.05);与EE组相比,1D、3D、9D组大鼠心功能指标降低程度减弱,有统计学差异(P<0.05),18D组与EE组相比心功能指标无统计学差异(P>0.05);1D组与3D组相比心功能指标无统计学差异(P>0.05),与1D组相比,9D组、18D组大鼠EDPVR、Tau值升高,ESPVR、dp/dtmax、dp/dtmin的绝对值明显降低,心肌收缩舒张功能降低,有统计学差异(P<0.05);与9D组相比,3D组大鼠dp/dtmax、dp/dtmin的绝对值、ESPVR升高,EDPVR、Tau降低,心功能增强,有统计学差异(P<0.05),与9D组相比,18D组大鼠SV、EF值、EDPVR明显降低,ESPVR、Ves升高,心功能减弱,有统计学差异(P<0.05)。4.各组大鼠心肌线粒体复合物呼吸速率的比较与CON组相比,EP组大鼠心肌线粒体复合物I、IV态3的呼吸速率及RCR值升高,有统计学差异(P<0.05);与CON组相比,各力竭组心肌线粒体复合物I、II、IV态3的呼吸速率及RCR值降低,尤其EE组与18D组降低更明显,有统计学差异(P<0.05);与CON组相比,EE、3D、9D、18D组大鼠线粒体复合物I态4的呼吸速率升高,有统计学差异(P<0.05)。与EE组相比,1D、3D、9D组大鼠线粒体复合物II态3的呼吸速率无统计学差异(P>0.05),1D、3D、9D组大鼠心肌线粒体复合物I、IV态3的呼吸速率升高,有统计学差异(P<0.05);EE组与18D组相比,大鼠心肌线粒体复合物呼吸速率无统计学差异(P>0.05)。与1D组相比,3D、9D组大鼠心肌线粒体复合物呼吸速率无统计学差异(P>0.05);与1D组相比,18D组大鼠心肌线粒体复合物I、II、IV态3的呼吸速率及RCR值降低,复合物I态4的呼吸速率升高,有统计学差异(P<0.05)。与9D组相比,18D组线粒体复合物I态3的呼吸速率及RCR值显著降低,有统计学差异(P<0.05),其余各复合物的呼吸速率无显著性差异(P>0.05)。5.各组大鼠心肌线粒体复合物呼吸速率与心功能参数的相关性分析通过Pearson线性相关分析,在CON组中复合物II的呼吸速率与CO成强正相关(P<0.01),与HR成负相关(P<0.05),与dp/dtmax成正相关(P<0.05)。在EE组中复合物I态4的呼吸速率与EDPVR成强正相关(P<0.01),与dp/dtmax成负相关(P<0.05);复合物I的态3呼吸速率与CO成正相关(P<0.05),与EF值成正相关(P<0.05);复合物II呼吸速率与Pes成正相关(P<0.05)。EP组复合物II呼吸速率与HR值成负相关(P<0.05);线粒体复合物IV呼吸速率与HR值成强负相关(P<0.01)。在1D组中复合物I态3的呼吸速率与CO成强正相关(P<0.01);复合物IV呼吸速率与CO成正相关(P<0.05)。在3D组中复合物IV呼吸速率与CO成正相关(P<0.05)。在18D组中复合物I态4的呼吸速率与Ped成正相关(P<0.05);复合物I的态3呼吸速率与CO成正相关(P<0.05)。结论:1.力竭运动通过下调心肌线粒体NADH及FADH2电子传递链,降低了线粒体呼吸复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ态3的呼吸速率,提高线粒体呼吸复合物Ⅰ态4的呼吸速率,导致心肌能量代谢障碍,心功能降低。2.运动预适应通过上调线粒体NADH电子传递链,提高了线粒体呼吸复合物Ⅰ、Ⅳ态3的呼吸速率,改善心肌线粒体呼吸功能,提高了心肌能量代谢,增强心功能,发挥对力竭大鼠心脏的保护作用。3.运动预适应对力竭大鼠心脏的保护效应随着停止训练时间的延长而降低,在停止训练3天内作用最显著,第9天减弱,第18天彻底消失。