论文部分内容阅读
毛冬青(Ilex pubescens Hook.Et Arn.),是冬青科(Aquifoliaceae)冬青属(Ilex L.)植物,我国毛冬青资源丰富,主产于广东、广西、安徽、福建、浙江、台湾等地。毛冬青根、根皮和叶均可用药,具有清热解毒,活血通脉等功效,用于治疗感冒,扁桃体炎,痢疾,血栓闭寒性脉管炎,口腔溃疡,冠心病等。经查阅相关文献,国内外学者已对毛冬青根的化学成分和药理活性进行较系统的研究,而关于毛冬青叶的研究主要体现在一些配方用药方面,其化学成分和药理活性的报道很少,只有1956年Arthur报道的毛冬青叶中含有齐墩果酸和熊果酸以,1992年俞祥生对毛冬青叶中的熊果酸、原儿茶酸和原儿茶醛含量的分析,及2011年倪晨报道毛冬青叶中IleageninA的含量。因此,为进一步弄清毛冬青叶在这些配方用药中的作用,与毛冬青根形成资源互补,同时发掘具有重要生物活性的先导化合物,创新新药提供资源,同时为响应节能的科学理念,充分利用毛冬青这一资源,本文就毛冬青叶的化学成分进行了研究。本文包括六部分,第一章:对冬青属植物的化学成分和药理活性的研究进展进行概述;第二章:采用分光光度法对毛冬青叶的乙醇提取物进行抗氧化活性研究;第三章:利用GC-MS技术分析鉴定毛冬青叶挥发油的化学成分;第四章:毛冬青叶的化学成分进行提取、分离和结构鉴定;第五章:利用正交实验优选毛冬青叶中三萜酸和总黄酮的最佳工艺条件,并通过颜色反应和IR谱对粗品进行初步的鉴定;第六章:总结。主要研究结果如下:(1)采用分光光度法对毛冬青叶的30%乙醇溶液、50%乙醇溶液、70%乙醇溶液、90%乙醇溶液等4种提取液及两个单体化合物A1和A2进行抗氧化活性研究,并与Vc进行比较。结果表明,在相同浓度下,清除DPPH自由基能力:Vc>50%乙醇提取物>30%乙醇提取物>90%乙醇提取物>70%乙醇提取物>A1>A2;清除O2-自由基能力:Vc>90%乙醇提取物>A2>A1>30%乙醇提取物>50%乙醇提取物>70%乙醇提取物;清除·OH自由基能力:90%乙醇提取物>Vc>A1>A2>50%乙醇提取物>70%乙醇提取物>30%乙醇提取物,由此可知,毛冬青叶乙醇提取液具有较强的清除自由基的能力,是一种很好的天然抗氧化剂。(2)利用GC-MS技术分析鉴定了石油醚和氯仿提取物化学成分,并对二者进行了比较。结果表明,石油醚提取的挥发油以饱和烃(13.063%)、苯丙素类(33.624%)、内酯类(15.587%)为主,其中相对含量最高的成分属异丁香油酚(28.967%),而氯仿提取的挥发油以饱和烃(64.033%)、脂肪酸类(12.891%)为主,相对含量最高的成分属二十烷(8.735%)。(3)从毛冬青叶乙醇提取物中分离得到22个单体化合物,并通过理化常数及各种波谱技术鉴定了其中的14个,分别为chaenomelosideA(1)、23-Aldehydepolomic acid(2)、熊果酸(3)、IlexgeninA(4)、ilexolic acid B(5)、chaenomelogeninA(6)、β-胡萝卜苷(7)、齐墩果酸(8)、二十六烷(9)、β-谷甾醇(10)、豆甾醇(11)、Pentadecanoic acid (12)、taraxerol(13)、对苯二酚(14),其中化合物1、2、6、13未见从该植物中分离得到的报道。(4)采用正交试验法优选毛冬青叶中三萜酸的提取工艺条件,以提取温度、料液比、乙醇浓度和提取时间为考察因素,确定毛冬青叶三萜酸的最佳提取工艺条件为:提取温度为56℃,料液比为1:16,乙醇浓度为70%,提取时间为90min,最佳工艺条件下平均得率为6.4868%;利用D101大孔树脂进一步纯化,并通过IR技术进行初步鉴定,得出三萜酸中含有和IlexgeninA相同的骨架。(5)采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法和分光光度法测定毛冬青叶中总黄酮的得率,通过单因素试验和正交试验确定超声温度、液料比、乙醇浓度、超声时间对毛冬青叶总黄酮提取的影响,最终优选出的最佳工艺参数为:超声温度60℃,料液比1:50,乙醇浓度40%,超声时间为120min;同时还探讨了D101大孔树脂对毛冬青叶总黄酮的纯化效果,结果表明,纯化后所得总黄酮粗品纯度达85.32%,该工艺操作简单,成本低,具有较大的实用价值。