【摘 要】
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目的:通过检测大肠癌中Skp2和P27kip1的表达及经Skp2反义寡核苷酸(ASODN)基因封闭后二者表达的变化,研究Skp2和P27kip1在大肠癌发生发展中的作用和相关性机制,并通过Skp2 ASO
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目的:通过检测大肠癌中Skp2和P27kip1的表达及经Skp2反义寡核苷酸(ASODN)基因封闭后二者表达的变化,研究Skp2和P27kip1在大肠癌发生发展中的作用和相关性机制,并通过Skp2 ASODN对大肠癌细胞增殖的影响,探讨以Skp2为靶点的反义基因治疗的可行性。方法:采用免疫组化法(SP)检测20例正常大肠粘膜、20例大肠腺瘤性息肉及60例大肠癌组织中Skp2和P27kip1蛋白表达,并分析与临床病理参数的关系。采用脂质体介导不同浓度的Skp2 ASODN转染大肠癌细胞株SW480,以Skp2无义寡核苷酸(NSODN)作对照,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法观察对细胞增殖的影响;流式细胞仪(FCM)检测对细胞周期的改变;并分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测SW480细胞中Skp2、p27kip1mRNA的表达和Skp2、P27kip1蛋白的表达情况。结果:免疫组化结果显示:Skp2蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤性息肉及大肠癌组织中的表达率分别为15.00%(3/20),45.00%(9/20)和71.67%(43/60),表达逐渐增高(P<0.01);P27kip1蛋白在上述三种组织中的表达率分别为90.00%(18/20),45.00%(9/20)和21.67%(13/60),表达逐渐降低(P<0.01)。二者表达呈明显的负相关性
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