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背景与目的：神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是起源于肾上腺神经脊谱系的儿童常见实体肿瘤，具有自发消退的特性，其发生与凋亡机制有关。目前普遍认为，细胞凋亡的发生与否是多种因素共同作用的结果，而基因的调控是其中极其关键的一个环节。 TRAIL、Caspase-3、Survivin是目前新发现的一类促进／抑制凋亡基因，其中TRAIL是肿瘤坏死因子（TNF）超家族的新成员，是一种Ⅱ型跨膜蛋白，可稳定地表达于几乎所有正常组织，主要选择性地诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常组织几乎没有影响；TRAIL主要通过其上的受体结合位点与相应受体结合，形成DISC复合物，并激活Caspase途径，从而诱导细胞凋亡。Caspase-3是半胱氨酸蛋白酶家族的成员，以前体的形式合成，处于细胞凋亡途径的中心地位；TRAIL、Fas、TNF等因子可激活Caspase级联反应，最终导致Caspase-3的活化并诱导细胞凋亡。Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新成员，可特异性地表达于肿瘤组织、胚胎和发育的胎儿组织，但在终末分化的成人组织（胸腺、生殖腺除外）中不表达，主要通过直接抑制Caspase-3、-7的活性，从而抑制细胞凋亡；此外，Survivin也可通过p21间接抑制Caspase-3、-7的活性。 关于上述三种基因在小儿神经母细胞瘤中的表达及调控机理，目前国内尚未见报道。本文旨在探讨这三种基因在小儿神经母细胞瘤发生、发展、临床诊断及预后判别中的价值，为NB的基因治疗提供一种富有前景的新方向。郑州大学2003年硕士研究生毕业论文凋亡调拉签因TRAIL、ea:pas。一3、Survivsn在神经 毋细胞瘤中的检测及意义（中文摘要决方法:本研究采用免疫组化s一P法检测CasPase一3蛋白的表达;TRAIL、SurvivinTUNELmRNA的表达采用原位杂交技术检测;单个细胞凋亡的检测采用法。以p<0.05作为差异具有显著性意义。结果: 1） TRAIL在NB、神经节细胞瘤及正常组织中表达的差别无显著性意义（p>0.05）;并且TRAIL在NB的不同分组中的表达差别亦无显著性意义（P>0 .05）。 2) CasPase一3在三种组织之间的表达差别，亦无显著性意义（P>0.05）。而在NB中:在组织分型、临床分期及病理分型组别中，caspase一3表达的差异具有显著性意义（p均<0.05）;但与年龄、性别、部位无关（p>0.05）。 3) survivin在NB中的表达明显高于在神经节细胞瘤及正常组织中的表达，差异具有显著性意义（p<0.01）;在后两种组织之间的表达差异无显著性（p>0 .05）:而在NB中:survivin的表达仅与年龄、临床分期及病理分型有关（尸均<0.001）。 4)TRAIL与Caspase一3在三种组织中均不具有相关性;survivin与easpase一3在NB中呈负相关（r=一0.702，尸=0.005），在其余组织中则不具有相关性。Survivin和TRAIL表达在三种组织中均无相关性。 5)三种组织中凋亡指数（AD的差别无显著性意义（p>0.05）;并且在NB中:只有组织分型、临床分期及病理分型分组中凋亡指数的差异具有显著性（p分别<0.05，0.002，0.002）;在其它分组中Al差异无显著性印均>0.05）。 6) TRAIL表达与Al在三种组织中均不具有相关性;而caspase一3表达与Al则均呈正相关（r=0.888、;=0.989、r=0.958，夕=0.000、0.000、0.000）:Survivin表达与Al在NB中呈负相关（r二一0.696，p二0.000），在另两种组织中均无相关性。 结论: 1) TRAIL表达无组织选择性，在NB、神经节细胞瘤及正常组织中均有较高的表达，但只有NB对TRAIL的诱导凋亡效应敏感。2)Caspase一3表达亦无组织选择性，但NB中一Caspase一3活性明显与NB郑州大学2003年硕士研究生毕业论文调亡调控基因TRAzL、Caspase一3、Survivin在神经 母细胞瘤中的检测及意义（中文摘要户的组织类型、临床分期及病理分型有关，活化的Caspase一3高度表达可以显著诱导NB细胞凋亡，有助于抑制NB的生长。 3） TRAIL对NB的诱导凋亡效应主要是通过激活ca，pase一3而发挥作用，但NB中Caspase一3的活化并不完全取决于TRAIL表达水平，可能是多种因素共同作用的结果。 4)Survivin主要特异性地表达于NB中，且survivin表达水平与影响NB预后的因素密切相关，可以作为一种新的NB诊断及预后判别的标志物，还可作为NB手术切除或放、化疗后再复发的监测物，在调控NB的发生、发展、分化及凋亡方面扮演了一个关键的角色。 5) NB自发消退或是恶性转移，取决于促凋亡基因和抑制凋亡基因的体内平衡;通过提高促凋亡基因的活性，同时抑制抗凋亡基因的表达，有助于NB的良性进展。 6)本研究结果揭示:TRAIL有望成为一种新的基因治疗剂用于临床，而利用反义技术抑制Survivin的表达，能提高Caspase一3的活性，显著降低肿瘤生长潜能，恢复NB对包括TRAIL在内的治疗剂的敏感性;以上研究为临床合理有效治疗NB提供了一种新思路。