脆性组氨酸三联体(flagile histidine triad，FHIT)基因是一个新的候选抑癌基因，定位于人类染色体3p14.2。本实验首先通过RT-PCR的方法从肝脏组织总：RNA中克隆了一段493bp的RHITcDNA序列，并将其构建到克隆载体pMDl8-T中 ，筛选连接方向正确的重组质粒，命名为pMD18-T-FHIT。以限制性核酸内切酶切割后，将回收到的目的片段分别插入双顺反子表达载体pIRES2-EGFP、融合表达载体pEGFP-C1和高效真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点(multiple cloningsite，MCS)中。经脂质体介导，将构建好的表达载体分别转染到HeLa细胞中，48小时后，在荧光显微镜下可观察到转染细胞发出的绿色荧光。利用G4.18筛选稳定转染的细胞后，提取细胞总DNA，PCR结果显示493bp的目的条带，证明砌T基因已稳定整合到细胞基因组中；再提取细胞总RNA，经RT-PCR检测，结果表明其在转录水平得到表达；利用兔抗人FHIT抗体对转染细胞作免疫细胞化学分析，DAB显色后观察到胞浆被染成棕褐色，而不表达目的蛋白的对照组中胞浆不被着色，这一结果说明FHIT基因在HeLa细胞内实现了稳定遗传与表达。最后，通过对转染细胞凋亡过程中的核DNA断裂端进行标记染色，进一步证明了缅胞内过表达FHIT基因产物可有效促进细胞凋亡。本研究对进一步了解ntr-f基因的抑癌作用，及其应用于肿瘤基因治疗的可能性具有重要的理论意义和参考价值。