【摘 要】
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MSTN作为肌肉生长抑制因子,属于TGF-β超家族成员。有大量研究报道,MSTN突变将引起肌肉过度增长,出现“双肌”表型。本研究以具有明显双肌表型的MSTN突变牛为实验材料,利用生
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MSTN作为肌肉生长抑制因子,属于TGF-β超家族成员。有大量研究报道,MSTN突变将引起肌肉过度增长,出现“双肌”表型。本研究以具有明显双肌表型的MSTN突变牛为实验材料,利用生物信息学技术在mRNA水平上和蛋白水平上确认MSTN其结构发生改变,同时利用荧光定量PCR和Western Blotting在mRNA水平和蛋白水平检测突变牛的MSTN表达情况,另外利用iCELLigence动态细胞分析仪检测MSTN突变细胞的生长状况。结果表明:(1)测序结果显示,MSTN突变牛突变位点为952bp-962bp处,缺失“TGAACACTCCA”11个碱基;(2)mRNA及蛋白结构预测情况表明,MSTN基因突变造成其mRNA及蛋白结构上的改变,可能影响了MSTN蛋白的功能;(3)荧光定量PCR及Western Blotting结果显示,野生型MSTN基因表达量高于突变型牛;(4)iCELLigence检测细胞生长情况,结果显示MSTN蛋白的突变抑制了肌肉细胞的增殖,从而促进了肌肉细胞的分化及肌管的形成。综上,引起实验动物出现双肌性状的MSTN蛋白不仅在结构上发生了改变,而且其蛋白的表达量也发生了显著改变。
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