通关藤药材真伪鉴别与品质评价研究

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目的:通过建立分子生物学方法,化学方法与指纹图谱技术相结合对通关藤药材进行真伪鉴别与品质评价,为该药材临床安全使用提供实验依据,也为通关藤药材的深入研究、相关制剂的研制生产奠定基础,更好地指导通关藤及其制剂在临床上的合理应用。方法:对课题组采集到的29个通关藤样品,分别进行定性鉴别(包括性状鉴别及DNA分子鉴别)、化学成分的含量和不同提取部位指纹图谱研究,综合样品各种鉴定结果,确定通关藤正品药材,并初步评价正品药材的品质。结果:性状鉴别结果:通过对收集的29个样品的性状鉴别确定标记为4、5、6、7、8号等14个样品为通关藤正品药材,其余皆为伪品,可确定的伪品为黑骨藤、黑风藤、钻山风等;DNA分子鉴别结果显示,4、5、6、8号等8个样品为通关藤正品药材,其余为伪品,伪品药材中有3个与正品亲缘关系较近;不同提取部位HPLC指纹图谱研究结果显示4、5、6、8号等8个样品为通关藤正品药材,其余均为伪品药材;总成分含量测定结果显示,正品药材甾体总皂苷含量均较高,而其余成分的含量正品与伪品无明显差异,且部分伪品中含有少量通关藤皂苷A。结论:1.对收集的29份通关藤样品性状、DNA分子条形码鉴别及化学指纹图谱鉴别结果最终确定正品药材共有8份,其余皆为伪品,可见通关藤药材掺假及误用现象严重;采用的DNA条形码鉴别可快速、准确鉴别样品;2.通关藤样品化学成分分析证实通关藤的正伪品在总皂苷含量和通关藤苷A的含量方面具有明显差别,正品含量明显高于伪品,而总黄酮和总多糖含量正伪品之间无明显差异,建议通关藤药材标准中可增加总皂苷含测项目;3.通过研究正品、伪品药材不同极性提取物的化学指纹图谱,发现正品与伪品药材各个极性不同提取部位的化学成分存在明显不同,进一步为该药材的真伪鉴别及品质评价提供了可靠手段。
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