目的：　　胰岛素抵抗在2型糖尿病（T2D）的发生和发展中起着至关重要的作用。因此，寻找能够逆转胰岛素抵抗的药物是治疗这种疾病的根本途径。近年来，成纤维细胞生长因子（FGF）作为潜在的胰岛素增敏剂用来缓解T2D和相关的代谢紊乱。FGF4作为旁分泌FGFs家族的重要成员，在胚胎发育过程中发挥着多种重要的调控功能。有报道旁分泌FGF1作为胰岛素增敏剂可以降低糖尿病小鼠血糖。那么，同样作为旁分泌蛋白的FGF4是否有相同的作用呢？本次研究，我们从改善胰岛素抵抗的角度探索了FGF4对代谢性疾病的调控作用，并进一步证明FGF4改善胰岛素抵抗可能通过肝脏，脂肪组织和肌肉等器官发挥作用以及研究相关信号通路。为探索、研发新型的胰岛素增敏剂提供理论依据。　　方法：　　①蛋白表达和纯化：本研究使用美国纽约大学Moosa Mohammedi教授实验室提供的 FGF4 质粒，将质粒导入 BL21(DE3)大肠杆菌细胞，在 37℃恒温摇床培养约4h，然后加入诱导剂IPTG，低温过夜诱导，得到含有目的蛋白大肠杆菌菌体。将得到的大肠杆菌用匀浆机破碎，用AKTA pure设备将破碎得到的菌液依次通过肝素亲和柱和分子筛（Superdex-100），从而得到高纯度的目的蛋白FGF4。用12% SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白纯度，确定其纯度＞98%。　　②临床抽选样本的检测：利用酶联免疫吸附测定技术（ELISA）分别测定11名正常人， 6名糖尿病病人血清中FGF1，FGF4，FGF7，FGF8，FGF20的含量。　　③Ⅱ型糖尿病模型：选取50只，10周龄，雄性db/db小鼠和20只同窝db/m小鼠，FGF4隔天腹腔给药（1.0 mg/kg），db/m和模型组注射相同量的0.9%生理盐水，连续给药5周，隔天监测血糖，摄食饮水和体重，在d28测ITT，d34测OGTT；选取20只，10周龄，雄性 ob/ob小鼠和10只同窝ob/m小鼠，FGF4隔天腹腔给药（1.0 mg/kg），ob/m和模型组注射相同量的0.9%生理盐水，连续给药5周，隔天监测血糖，摄食饮水和体重。　　④组织分析：收集各模型小鼠的血清，肝脏和脂肪组织。采用 western blotting，q-PCR，免疫组织化学，PAS 染色，油红 O染色等方法进行组织分析。　　⑤体外细胞实验：HL7702 细胞，使用含有 15% FBS的1640培养基进行培养，待细胞长至对数生长期，使用含1% FBS的1640饥饿培养基饥饿24h，分别加入FGF1和FGF4(10, 100, 500 ng/mL)孵育20min，采用western 印迹的方法检测相关信号蛋白的表达情况。　　结果：　　2型糖尿病人和小鼠血清中，FGF1，FGF4，FGF7的含量显著下降，并且与FGFR1有较强的亲和能力。在用FGF4处理的胰岛素抵抗小鼠（T2D小鼠db/db和ob/ob）均发现稳定的降糖作用，并且胰岛素耐量试验（ITT）和口服葡萄糖耐量试验（OGTT）均显示，胰岛素抵抗有显著改善。HE染色，PAS染色，油红O染色和免疫组化的结果均显示FGF4对肝脏脂肪变性有明显的改善。体外细胞实验与动物实验结果一致，在HL-7702细胞中FGF4可以增加FRS2，PLCγ， PPARγ和IRS-1的磷酸化水平。　　结论：　　在这里，我们已经证明急性和慢性FGF4治疗可以增强T2D小鼠中的胰岛素的作用，可能通过上调肝脏，脂肪和肌肉组织中IRS-1和AKT的磷酸化水平发挥作用。此外，通过抑制脂质合成和积聚，FGF4对肝脂肪变性具有强大的治疗作用。此外，FGF4对肝脏的代谢改善主要由FGFR1及其下游信号PPARγ的激活介导。这些结果表明FGF4可以充当潜在的胰岛素增敏剂以缓解和T2D相关的代谢紊乱。