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巴戟天(Morinda officinalis Radix)来源于茜草科巴戟属植物巴戟天的干燥根。本论文以巴戟天为原料,通过对比Bacillus sp.DU-106、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、酵母菌RV171发酵巴戟天以及传统盐制巴戟天活性成分的差异,筛选出适合巴戟天发酵的菌种;并对巴戟天发酵工艺进行优化,同时监测发酵过程中活性成分变化规律;提取、纯化了工厂巴戟天、盐制巴戟天、发酵巴戟天多糖,初步探究了三种多糖组分的体外免疫活性。主要结论如下:(1)相比工厂巴戟天、传统盐制巴戟天,采用4个菌种发酵炮制后巴戟天的多糖、游离蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素、水晶兰苷、果糖、葡萄糖含量等均显著性的提高,且降低了胰蛋白酶抑制剂活力;发酵法炮制巴戟天在水溶性浸出物、蔗糖、1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖方面有所消耗,而其中酵母菌几乎全部消耗了巴戟天寡糖;综合对比主要活性成分差异,Bacillus sp.DU-106优于鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌及酵母,最终筛选Bacillus sp.DU-106作为巴戟天发酵炮制的菌种。(2)优化了Bacillus sp.DU-106发酵炮制巴戟天工艺,最优发酵条件为沸水煮制巴戟天20 min,培养基葡萄糖添加量为2%,接种量为10~7 cfu/mL,发酵温度为26℃。在此工艺下,得到发酵巴戟天的多糖含量为5.44%,相比工厂巴戟天,多糖含量提高了22.44%。(3)Bacillus sp.DU-106发酵炮制巴戟天过程中多糖含量在2 d时达到最高值4.76%,其后逐渐下降;游离蒽醌在4 d后显著性的上升,6 d时含量达到最高0.058mg/g,随后呈现波动变化,但总体稳定;甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素变化规律类似,均先上升后小幅下降,甲基异茜草素-1-甲醚含量在8 d达到最高值37.21 mg/kg,甲基异茜草素含量在6 d达到最高值14.11 mg/kg;水晶兰苷先大幅上升,后小幅下降,在2 d时含量达到最大值8.02 mg/g;DU-106在发酵0-4 d时,降低了蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖和1F-果呋喃糖基耐斯糖的含量,提高了果糖和葡萄糖含量;在发酵4-10d时,消耗葡萄糖,提高果糖、蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖和1F-果呋喃糖基耐斯糖的含量;在发酵10-12 d时,提高了果糖含量,显著降低蔗糖、葡萄糖、蔗果三糖、耐斯糖和1F-果呋喃糖基耐斯糖的含量;胰蛋白酶抑制剂活力发酵在0 d-4 d时逐渐下降,而在6 d时有所上升,之后继续下降至最低2.02 TIU/mg。(4)工厂巴戟天、盐制巴戟天、发酵巴戟天多糖经热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白、透析脱盐、阴离子层析柱DEAE-Sepharose Fast Flow纯化后,都得到了5个组分,其中都是0.3 mol/L NaCl组分相对含量较多,相对含量分别达到了48.76%、69.83%、74.75%,相比于MP-1,SMP-1和BMP-1相对含量下降较多。发酵炮制改变了巴戟天多糖组分的相对含量。(5)三种巴戟天多糖0.3 mol/L NaCl组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7基本没有毒性;三种巴戟天多糖刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-α、IL-1β的规律不完全相同:SMP-4在15.625-500μg/mL浓度下对刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-α的活性优于MP-4,其次是BMP-4;BMP-4在15.625-500μg/mL浓度下对刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌IL-1β的活性优于MP-4,其次是SMP-4。炮制对于巴戟天多糖的免疫活性有利有弊。