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背景外伤性视神经病变是神经眼科常见病,对患者视功能损伤巨大,且预后较差。目前无论是外伤后使用大剂量糖皮质激素冲击治疗或者是视神经管减压术,均缺乏有效证据证实其疗法。目前动物模型也不统一。中医眼科在临床过程中,对外伤性视神经病变积累了大量经验。中医理论认为,外伤性视神经病变属于“撞击暴盲”的范畴,运用重明益损汤治疗外伤性视神经病变在临床上取得了一定疗效。目前基础研究认为,视神经节细胞在凋亡的过程中,有些关键蛋白如Trk家族受体蛋白、p75NTR蛋白等发挥了重要作用。本研究通过横向定量牵拉法牵拉视神经前期研究中发现能造成视网膜神经节细胞凋亡,为了检测分子学凋亡机制,对正常组、对照组和实验组视网膜中p75NTR mRNA.JNK蛋白、p75NTR蛋白和TrkB蛋白的变化进行了测定;对重明益损汤中的主药黄芪对外伤性视神经病变的治疗效果进行了初步探究。目的使用横向定量牵拉法造成大鼠视神经损伤后,测定视网膜内p75NTR mRNA及蛋白的变化,TrkB蛋白的变化,JNK蛋白的变化以及应用黄芪注射液对p75NTR 和 TrkB蛋白表达量的影响。方法1)JNK蛋白的半定量:随机取实验大鼠60只分组,每组30只:A组:横向张力计定量牵拉左眼视神经0.1N×15s,从术后第二日起予生理盐水0.5mL腹腔注射15天;B组:左眼为假手术眼,仅暴露视神经和圈住视神经但不进行牵拉损伤。各组的右眼均不处理。15d后取其视网膜冻存于液氮中,进行JNK蛋白的ELISA法半定量实验。2)p75NTRmRNA的RT-PCR测定:随机取实验大鼠24只分组,每组12只:A组:横向张力计定量牵拉左眼视神经0.1N x 15s,从术后第二日起予生理盐水0.5mL腹腔注射;B组:左眼为假手术眼,仅暴露视神经和圈住视神经但不进行牵拉损伤。各组的右眼均不处理,术后第十五天取左眼视网膜冻存于液氮中,进行对p75NTR的RT-PRC检测。3)随机取实验大鼠90只分组,每组30只:A组:横向张力计定量牵拉左眼视神经0.1N x 15s,从术后第二日起予生理盐水0.5mL腹腔注射;B组:左眼为假手术眼,仅暴露视神经和圈住视神经但不进行牵拉损伤;C组:横向张力计定量牵拉左眼视神经0.1N x 15s,从术后第二日起予黄芪注射液0.5mL腹腔注射。各组的右眼均不处理,作为各组的正常对照眼。15天后取双侧视网膜冻存于液氮中,进行Western Blotting对p75NTR和TrkB蛋白的检测。结果与假手术组相比,手术组视网膜的p75NTR mRNA、JNK蛋白表达量在手术后15d时均上调(p均<0.05),TrkB蛋白的表达量下调(p<0.05)对视网膜中p75NTR的表达量的影响未知(p>0.05);黄芪注射液能轻微提高受损眼的视网膜中TrkB蛋白的表达量(p<0.05),对视网膜中p75NTR的表达量的影响未知。结论横向牵拉法对视网膜神经节细胞的损伤很明显,可以用其模拟外伤性视神经病变进行后续实验;黄芪注射液对视网膜神经节细胞可能有一定的神经保护作用。