水曲柳体细胞胚胎发生及体细胞胚与合子胚的发育

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水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)是中国东北地区重要的用材树种和园林绿化树种.在此之前,有关其胚胎发生发育方面的研究报道几乎为零.该文首次对水曲柳的体细胞胚胎诱导和合子胚与体细胞胚发育的细胞学过程作了系统研究.在胚胎发育的细胞学研究中,采用石蜡切片法,结合艾氏苏木精整体染色,在光学显微镜下,对水曲柳体细胞胚胎发生与合子胚的发生发育过程进行了细胞学方面的观察,并将两个胚胎发生系统进行了对比研究.合子胚细胞学研究表明,水曲柳雌蕊二心皮二室,每室二胚珠,胚珠倒生,薄珠心,蓼型胚囊.单孢原,大孢子四分体线形排列,通常合点端大孢子为功能大孢子.核型胚乳,胚乳发育先于胚的发育,胚胎发育为紫菀型.观察中发现了一些异常现象,表现为四个大孢子中合点端第二个大孢子为功能大孢子,或珠孔端与合点端两个为功能大孢子.体细胞胚胎发生的细胞学研究表明,水曲柳合子胚子叶形成的体细胞胚直接发生于子叶的表皮细胞,为单细胞起源.间接发生的体细胞胚则形成于愈伤组织的表面或内部.胚性愈伤组织细胞较小,接近圆形,排列紧密,胞质浓厚,核大,核仁明显.非胚性细胞相对较大,形状不规则,排列疏松或紧密,胞质稀薄,大液泡,核小,偏向细胞一侧.体细胞胚从心形胚阶段开始出现维管束分化.鱼雷期以后维管束呈明显"丫"字形,与母体组织无联系.体细胞胚具明显的极性.体细胞胚与合子胚的发生程序基本相同,都经历了原胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶胚这几个典型发育时期.其形态发生过程的主要区别在于:(1)体细胞胚体积通常小于相同发育阶段的合子胚;(2)体细胞胚一般没有明显胚柄;(3)子叶期以后的体细胞胚在形态上有较多变异.该研究首次诱导了水曲柳的体细胞胚胎发生,并筛选了适合水曲柳体细胞胚胎发生的外植体及培养条件,这是水曲柳离体培养研究上的重大突破,使运用现代生物技术进行水曲柳的离体快繁和遗传工程成为可能;系统的胚胎发育的细胞学研究,在水曲柳的胚胎发育生物学研究领域也是首次,对水曲柳育种工作及其它树种相关方面的研究具有重要的参考价值.
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