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当前,农产品的病虫害防治仍以化学防治为主,有机磷和氨基甲酸酯类农药仍然是目前在蔬菜、粮食等作物上使用最广泛的农药。随着病虫害抗药性的逐年增加,农药用量越来越大,施药次数更加频繁,使农药残留问题更加突出,食用农药超标的蔬菜、水果等而发生食物中毒的事件时有发生。因此,建立一套简便、快速、准确、能在农产品生产和流通各环节现场检测的农药残留检测方法,控制“超毒”果蔬流入市场已成为急待解决的问题。本课题在前人研究的基础上,对农药残留快速检测方法——胆碱酯酶抑制法进行了研究。 酶抑制法理论基础是有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制动物体内胆碱酯酶（Cholinesterase, ChE）的活性,在一定条件下,ChE的活性变化与有机磷农药的浓度存在良好的相关性,从而通过测定农产品的农药残留提取液对ChE酶活力的影响即可判定农药残留的情况。本课题从酶源的筛选入手,获得一种来源广泛、廉价、对常见有机磷及氨基甲酸酯类农药敏感的血清胆碱酯酶,并对该酶的纯化方法和基本酶学性质进行了研究,在此基础上,建立了两种快速检测方法:比色法和试纸法。研究结果如下: 通过对6种不同动物组织的胆碱酯酶的比较研究,最终选择以A血清BChE作为农药残留的检测用酶。该酶经过两次硫酸铵盐析、DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析后,其比活力由21.5U/mg提高到5944.1U/mg,纯化278.5倍,回收率为17.8%,达到电泳纯。该酶的Km=2.4×10-5,碘化硫代丁酰胆碱对该酶没有过量底物抑制现象,最适反应温度为37℃,最适反应pH值为7.5～8.0;该酶热稳定性较好,在37℃～40℃保温60min,酶活力基本不变,敌敌畏（DDVP）对该酶的IC50为0.001mg/kg。 在此基础上,建立了两种农药残留的快速检测方法。①比色法:以碘化硫代丁酰胆碱（BTChI）为底物,5-5’-二硫代-二硝基苯甲酸（DTNB）为显色剂,412nm比色测定吸光值变化,计算胆碱酯酶的抑制率,进而推算农药残留情况。当抑制率大于35%时,表明农药含量超标。检测过程只需20min～40min,可同时进行多个样