【摘 要】
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目的采用“硫酸脱氢表雄酮（DHEA）联合氢化可的松”法制备肾虚型多囊卵巢综合征小鼠模型,比较各组间小鼠体重变化、卵巢湿量、卵巢指数,卵巢HE染色后组织学改变,各项生殖激素的变化,以及环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷（cAMP/cGMP）、抗苗勒管激素（AMH）、干细胞因子（SCF）,观察滋肾育胎丸对肾虚型多囊卵巢综合征（PCOS）模型小鼠的影响,初步探究其作用机理。方法选取23日龄ICR雌性小鼠54只,随机
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目的采用“硫酸脱氢表雄酮（DHEA）联合氢化可的松”法制备肾虚型多囊卵巢综合征小鼠模型,比较各组间小鼠体重变化、卵巢湿量、卵巢指数,卵巢HE染色后组织学改变,各项生殖激素的变化,以及环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷（cAMP/cGMP）、抗苗勒管激素（AMH）、干细胞因子（SCF）,观察滋肾育胎丸对肾虚型多囊卵巢综合征（PCOS）模型小鼠的影响,初步探究其作用机理。方法选取23日龄ICR雌性小鼠54只,随机分为6组,每组9只:阴性对照组（A）、模型组（B）、滋肾育胎丸低剂量组（C）、滋肾育胎丸中剂量组（D）、滋肾育胎丸高剂量组（E）、达英-35组（F）。每天记录各组小鼠体重。造模:各组适应性喂养2天后,A组予每日颈背部皮下注射用油剂0.1ml,连续40天,其余组予颈背部皮下注射9mg/100g DHEA油溶液0.1ml,每日1次,连续40天,制备PCOS动物模型。注药第26天,阴性对照组加用等体积生理盐水0.2ml灌胃,日一次,连续10天,其余组加用加用氢化可的松25mg/kg体重后肢肌肉注射,日1次,连续14日,制备肾虚型动物模型。给药:治疗组在造模的同时予预防性治疗,（C）、（D）、（E）组分别予滋肾育胎丸丸剂水溶液分别按1.13g/kg、2.25g/kg、4.50g/kg体重灌胃,日一次,共40天（第41日龄不予灌胃）,（F）组予达英-35蒸馏水混悬液0.2ml/10g灌胃,日一次,共40天（第41日龄不予灌胃）。从28日龄起每日取阴道分泌物涂片,在光镜下观察并记录阴道脱落细胞的形态。末次给药后,禁食12小时（晚上20:00至次日8:00）,次日晨称体重,眼球摘除取血,同时测定空腹血糖,对小鼠行颈椎脱臼法处死并解剖取出卵巢,剔除周围脂肪组织后分别称重,计算卵巢湿量、卵巢指数。所取卵巢进行病理切片,在光学显微镜下观察组织形态变化。用酶联免疫测定法测定E2、T、LH、FSH、cAMP、cGMP、AMH、SCF浓度,并计算 LH/FSH、cAMP/cGMP。结果1.模型组体重增量较阴性对照组明显降低（p＜0.01）,动情周期紊乱,卵巢湿重及卵巢指数升高（p＜0.01）,病理可见生长卵泡及黄体较少,闭锁卵泡较多;模型组血清T、LH、LH/FSH水平均较阴性对照组升高（p＜0.05）;模型组血清cAMP水平较阴性对照组升高（p＜0.05）,血清cGMP水平降低（p＜0.01）。2.中药中、高剂量组及达英-35组体重增量较模型组明显升高（p＜0.05）,动情周期逐渐恢复正常,卵巢湿重及卵巢指数降低（p＜0.05）,生长卵泡及黄体增多。3.中药中、高剂量组及达英-35组较模型组血清T、LH、LH/FSH水平均降低（p＜0.05）。4.中药中、高剂量组血清cAMP水平较模型组降低（p＜0.01）,血清cGMP水平升高（p＜0.01）。5.中药低、中、高剂量组及达英-35组血清AMH水平较模型组降低、SCF水平升高（p＜0.01）。结论1.通过皮下注射DHEA,配合肌肉注射盐酸氢化可的松的方法能够成功制备肾虚型PCOS小鼠模型。2.滋肾育胎丸能增加肾虚型PCOS模型小鼠的体重,明显改善动情周期,恢复卵巢组织形态。3.滋肾育胎丸能改善肾虚型PCOS模型小鼠生殖激素水平。4.滋肾育胎丸能改善模型小鼠肾虚证指标。5.滋肾育胎丸能改善肾虚型PCOS模型小鼠的卵巢机能,调节生殖轴、促使卵泡发育成熟及排卵,其机制可能与降低血清AMH、升高SCF水平有关。
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