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目的:研究野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型中大鼠肺血管平滑肌增殖与肺动脉TMEM16A蛋白表达的相关关系。方法:50只8周龄健康雄性SD大鼠,随机分成五组,组别为对照组、模型1周组、模型2周组、模型3周组、模型4周组,每组10只。对照组单次腹腔注射体积分数为1%的DMSO溶剂,其余四组单次腹腔注射野百合碱(50mg/kg)后制备相应模型组,造模后各组大鼠均给予正常喂养。利用小动物超声系统测定各组的肺动脉加速时间(PAT)、射血时间(ET)、PAT/ET间接评估肺动脉压力,测量大鼠右心房横径(RATD)、右心房纵径(RAVD)大小;测定大鼠的右心室肥厚指数(RVHI);HE染色检测肺血管重塑如肺小血管横截面管壁面积与血管面积比值(WA%);肺小动脉管壁厚度占血管直径的百分比(WT%)等病理学指标;通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测肺血管上跨膜蛋白16A(TMEM16A)和增殖核抗原(PCNA)蛋白的相对表达量,通过实时荧光聚合酶链反应技术(quantitative real-time PCR,qPCR)检测肺血管上TMEM16AmRNA的相对表达量;采用免疫荧光化学法检测各组肺血管平滑肌上TMEM16A和平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达;并对TMEM16A与WA%、PCNA,PCNA与WA%进行相关性分析。结果:1超声心动图测量PAT、ET、RATD、RAVD结果显示:3周组、4周组较对照组PAT、ET、PAT/ET值明显降低,差别均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,4周组RATD明显增大,差别具有统计学意义(P<0.05)。3周组、4周组RAVD明显增大,较对照组差别均具有统计学意义(P<0.05)。2测量大鼠右心室肥厚指数发现:与对照组相比,2周组、3周组、4周组的RVHI逐渐增高,差别均具有统计学意义(P<0.05)。3肺血管HE染色显示:对照组血管内壁光滑,内皮细胞连续性较好,细胞分布均匀,血管平滑肌未出现增生肥大现象,无渗出及大量炎细胞浸润。而野百合碱给药组随着造模时间延长,可以观察到血管内皮细胞连续性较差,血管平滑肌细胞增生、肥大,血管腔狭窄闭塞,大量炎细胞浸润。2周组、3周组、4周组较对照组WT%、WA%逐渐增高,差别均具有统计学意义(P<0.05)。4 Western blot和qPCR检测TMEM16A蛋白、PCNA蛋白和TMEM16AmRNA的相对表达量,结果显示TMEM16A蛋白、PCNA蛋白和TMEM16AmRNA的相对表达量逐渐增加,2周组、3周组、4周组的TMEM16A蛋白、PCNA蛋白和TMEM16AmRNA的相对表达量差别均具有统计学意义(P<0.05)。5免疫荧光法检测发现肺血管平滑肌上TMEM16A的表达含量逐渐增加,且与肺血管平滑肌细胞共定位。6相关性分析表明,TMEM16A与WA%、PCNA,PCNA与WA%之间均呈正相关,相关系数分别为r=0.8352,r=0.8348,r=0.8409。结论:TMEM16A蛋白以及TMEM16AmRNA表达水平均随造模时间延长而升高。TMEM16A与野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构与肺血管平滑肌增殖呈正相关,提示TMEM16A可能是肺动脉高压疾病进展中的重要蛋白。