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目的研究高浓度葡萄糖对体外培养胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响及其机制。方法1、将分离的SD大鼠胰岛按培养液中葡萄糖的浓度和培养时间的不同分为六组:NG1组(葡萄糖5.6mmol/L培养1天)、NG2组(葡萄糖5.6mmol/L培养3天)、NG3组(葡萄糖5.6mmol/L培养5天);HG1组(葡萄糖25.6mmol/L培养1天)、HG2组(葡萄糖25.6mmol/L培养3天)、HG3组(葡萄糖25.6mmol/L培养5天)。2、采用双硫腙染色法和免疫组织化学技术鉴定胰岛细胞团;3、体外胰岛素刺激释放(GSIS)实验,放免法检测胰岛素水平;TUNEL法检测胰岛的凋亡情况;4、逆转录-荧光定量-多聚酶链反应(RT-FQ-PCR)技术检测胰岛中胰岛素、PDX-1、Casoase-3、BAX等基因mRNA的定量表达。结果1、HG组各组胰岛素分泌量均低于NG组各组(P＜0.05):各NG组的GSIS实验,其胰岛素分泌量无明显差异(P＞0.05);HG1组的胰岛素分泌量高于HG2、3组(P＜0.05)。2、HG1组胰岛素基因表达高于其余各组(P＜0.05),但HG2、3组胰岛素基因表达分别低于NG2、3组(P＜0.05):各HG1组、2组和3组PDX-1表达分别高于各NG1组、2组和3组(P＜0.05),但HG3组与HG1、2组比较PDX-1表达下降(P＜0.05)。3、HG1组、2组和3组胰岛细胞凋亡率均明显高于各对应的NG1组、2组和3组(P＜0.05)。4、RT-FQ-PCR显示HG1组、2组和3组与各对应的NG1组、2组和3组相比,Caspase-3、BAX基因mRNA的表达增加(P＜0.05),且HG3组高于HG2组,HG2组高于HG1组(P＜0.05);NG3组与NG1、2组相比Caspase-3和BAX基因mRNA的定量表达增加(P＜0.05)。结论1、本研究在建立SD大鼠胰岛离体培养体系的基础上,基本了解离体胰岛在体外培养条件下的生长情况。2、高糖环境抑制葡萄糖刺激胰岛素分泌功能,且作用时间越长抑制作用越明显。3、短期的高糖环境能在一定程度上刺激PDX-1基因和胰岛素基因表达,但长期的高糖环境则表现为抑制作用,且时间越长抑制作用越明显。提示糖尿病患者保持正常的血糖水平对保护胰岛功能有重要意义。4、高浓度葡萄糖能使SD大鼠胰岛凋亡明显增加,且作用时间越长凋亡越明显,细胞内的Caspase-3、BAX等基因表达增多,提示胰岛细胞凋亡与氧化应激和促凋亡基因表达增加等机制有关。