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研究背景： 新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是一种发生于新生儿的严重胃肠道炎症性疾病,其发病率和病死率均较高。目前,NEC的病因和发病机制尚不完全明确,也无确切有效的预防和治疗方法。研究表明:早产、低出生体重、人工喂养、缺氧缺血、细菌感染等是NEC发病的危险因素;生后细菌定植过程中的异常免疫反应以及遗传易感性被认为在NEC的发病中具有重要作用。髓样分化蛋白-2(MD-2)和GM2活化蛋白(GM2A)都是MD-2相关性脂质识别(ML)家族的成员,MD-2是Toll样受体-4(TLR4)信号通路中识别脂多糖的CD14-TLR4/MD-2受体复合体的必不可少的成分之一,GM2A能够通过将血小板活化因子(PAF)转化为无活性的lyso-PAF而抑制炎症反应。而TLR4信号通路和PAF在NEC的发病中均具有重要作用。虽然研究表明MD-2和GM2A在NEC发病中发挥作用,但并无关于MD-2和GM2A基因多态性与NEC关系的报道。因此,本课题从遗传学角度,通过研究MD-2和GM2A基因的单核苷酸多态性,以探讨NEC的遗传易感性。 研究目的： 1.分析2011.6～2012.6收治于广州市妇女儿童医疗中心的42例NEC病例(Bell分期≥Ⅱ期)的临床资料; 2.检测以上42例NEC新生儿MD-2基因的多态性,阐明MD-2基因多态性与NEC的关系; 3.检测以上42例NEC新生儿GM2A基因的多态性,阐明GM2A基因多态性与NEC的关系。 方法： 查阅2011.6～2012.6收治于广州市妇女儿童医疗中心的42例NEC新生儿(Bell分期≥Ⅱ期)的病历,总结分析其临床特点。用基因测序的方法对上述42例NEC病例的MD-2基因外显子、启动子C-1625G多态位点区域和GM2A基因外显子进行重测序,筛查目的片段的单核苷酸多态性位点,并将检测到的多态位点与同期83例正常新生儿进行对照,比较检测到的功能性多态位点的等位基因频率和基因型频率在NEC组、对照组、NEC手术/非手术组、NEC足月/早产儿组等之间的差异。 结果： 1.42例NEC中,足月儿25例,早产儿17例;手术病例20例,非手术病例22例。足月儿病例和早产儿病例比较,发病的平均日龄分别为7.2天和13.7天;7日内发病例数所占比例分别为64.00％和29.41%(P<0.05);诊断时已为Ⅲ期(Bell分期)的病例所占比例分别为32.00%和11.76%(P>0.05);伴发其他严重疾病的病例所占比例分别为60.00%和23.53%(P<0.05);手术率分别为56.00%和35.29%(P>0.05)。手术病例和非手术病例比较,平均胎龄和出生体重的差异无统计学意义(P>0.05)。 2.MD-2基因外显子区域未检测到频率异常的多态性位点;启动子区域的rs11465996位点的多态性在NEC组和对照组之间的差异无统计学意义,但NEC手术组中携带C低频等位基因的基因型频率显著高于对照组(χ2=4.388,P=0.036)。 3.GM2A基因编码区域检测到3个高频率的多态位点(rs1048719、rs153477、rs1048723),位于1号外显子的rs1048719的低频等位基因(A)频率和携带低频等位基因的基因型频率在NEC组和对照组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。另外,本研究检测到一个位于内含子区域的多态性位点(rs2075783),C为低频等位基因,NEC组和对照组携带C等位基因的基因型频率分别为42.86%和13.25%,差异具有统计学意义(P<0.05),且足月儿组显著高于早产儿组(P<0.05)。 结论： 1.足月儿NEC发病率增高,与早产儿比较,足月儿发病更早、进展更快;危险因素、病程等与早产儿NEC比较也有不同特点; 2.MD-2基因外显子区域的多态性与NEC的发病无关,启动子区域的C-1625G(rs11465996)多态性与NEC的严重程度具有相关性; 3.GM2A基因1号外显子的rs1048719多态性以及内含子区域的rs2075783多态性与NEC的发病存在关联。