苦豆子类生物碱是从药用植物苦豆子中提取分离纯化的一类生物碱,包括苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱、槐胺碱、莱曼碱等共二十余种,他们均属于喹诺里西啶生物碱(Quinolizidine),化学结构相似。苦豆子类生物碱药理作用广泛,如解热、镇痛、抗炎、平喘、抗肿瘤以及抗心律失常等。在中枢作用方面,苦参碱和槐定碱分别是这类生物碱中具有抑制作用和兴奋作用的代表,有文献报道苦参碱具有镇静、镇痛以及降低体温等作用,而槐定碱则可兴奋中枢并诱发癫痫样反应。本实验以苦参碱和槐定碱为研究对象,采用神经电生理学方法观察了这两种药物对中枢神经突触可塑性的影响,并对槐定碱致癫痫样作用进行研究。第一部分:苦参碱和槐定碱对神经可塑性的影响目的:以苦参碱(matrine)和槐定碱(sophoridine)为研究对象,采用神经电生理学方法观察了这两种药物对中枢神经突触可塑性的影响。方法:采用急性埋藏电极记录麻醉大鼠海马齿状回诱发电位的方法,以群峰电位峰值幅度(PS amplitude)和群体兴奋性突触后电位始段上升斜率(pEPSP slope)为观察指标,观察苦参碱和槐定碱对内侧穿行通路(MPP)-海马齿状回(DG)颗粒细胞这一神经通路联系上基础突触活动、LTP诱导以及双脉冲刺激反应的影响。苦参碱和槐定碱以腹腔注射(i.p.)形式给药,剂量分别为:苦参碱7.8、15.6、31.2mg/kg,槐定碱3、6、12mg/kg。引发LTP的条件刺激为60Hz、60个脉冲的高频刺激,双脉冲刺激实验按刺激间隔(IPIs)20～1000ms分别给出。结果:(1)苦参碱能够显著抑制基础诱发电位中的PS幅度和pEPSP slope;能够显著抑制条件刺激(60 pulses at 60Hz)引发的LTP的PS幅度,但对pEPSP slope没有影响;纳洛酮能够翻转苦参碱在LTP诱导中的抑制作用;苦参碱对双脉冲刺激反应没有影响。(2)槐定碱能够明显增强基础诱发电位的PS幅度,但对pEPSP slope没有影响;能够促进条件刺激(60 pulses at 60Hz)引发的pEPSP slope LTP现象,但对PS幅度没有影响;槐定碱对双脉冲刺激反应有明显的抑制作用。结论:(1)苦参碱对麻醉大鼠海马DG颗粒细胞的兴奋性和MPP-DG通路形成的突触联系过程均有抑制作用;对高频条件刺激诱发LTP后突触后颗粒细胞的兴奋性仍有抑制作用,但对条件刺激后突触的传递效能没有影响;纳洛酮能够翻转苦参碱在LTP诱导中对PS幅度LTP的抑制作用,提示苦参碱的抑制作用可能与激动中枢阿片受体有关;苦参碱对长时程突触可塑性的影响机制可能与短时程突触可塑性中的细胞和突触机制无关。(2)槐定碱对基础突触传递过程中海马DG颗粒细胞的兴奋性有促进作用,但对MPP-DG通路形成的突触联系过程没有影响;对高频刺激诱发LTP后突触后颗粒细胞的兴奋性没有影响,但对高频刺激诱发LTP后的突触传递过程有促进作用;槐定碱可能通过提高细胞外钙离子浓度和突触前递质释放几率而发挥其在双脉冲刺激反应中的抑制作用。第二部分:槐定碱致癫痫样作用研究目的:观察槐定碱(sophoridine)致痫大鼠清醒核团脑电(IEEG)变化特点;研究痫样特征分类,并利用工具药研究致痫作用机制。方法:采用慢性埋藏电极记录清醒大鼠核团脑电(intracranial electroencephalography, IEEG)的方法,观察槐定碱对大鼠产生痫样放电的特点,并判断致痫原发部位;采用小鼠模型实施工具药拮抗实验,探讨槐定碱所致癫痫样发作的作用机制。结果:海马齿状回(DG)内颗粒细胞对于槐定碱致痫作用最敏感,其次是内侧穿行通路(MPP)和颞叶皮层(TC)。阈下催眠剂量的地西泮、催眠剂量的巴比妥钠可以对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生;对抗最大电休克剂量的苯妥英钠不能对抗槐定碱引起的痫样惊厥的发生,但可以延缓惊厥的发生时间和小鼠的死亡时间。结论:海马内部异常放电在槐定碱致痫作用中可能起到重要作用,海马部位可能是痫样发作的原发部位;槐定碱的致动物癫痫样发作属于临床小发作类型,地西泮是较理想的预防药物。