脑缺血耐受与脑自体神经干细胞增殖关系及DOR在缺血耐受中的作用研究

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第一部分大鼠脑缺血耐受与脑自体神经干细胞增殖关系的研究目的:明确缺血预处理(IPC)与大鼠脑梗死后7天海马区自体神经干细胞增殖的关系,以及其对大鼠脑梗死后神经行为学评分的影响。方法:采用二次线栓法建立局灶—局灶性SD大鼠脑缺血耐受(IP/IT)模型,40只SD雄性大鼠随机分为:A、假手术(Sham)组;B、缺血(MCAO)组;C、假手术+缺血(Sham+MCAO)组;D、预缺血+缺血(IP+MCAO)组;每组各10只。大鼠在处死前一天予腹腔注射BrdU,共3次,每4h 1次,每次50mg/kg。采用Zea-Longa评分方法对大鼠脑梗死后3d,7d进行神经行为学评分,运用荧光免疫组织化学技术检测大鼠脑缺血侧海马区BrdU标记阳性细胞数量。结果:SD大鼠脑梗死后3d、7d,Zea-Longa神经行为学评分MCAO、Sham+MCAO两组与IP+MCAO组间均有统计学差异(P<0.01),而MCAO和Sham+MCAO组间无统计学差异(P>0.05)。SD大鼠脑梗死后7天,缺血侧海马区BrdU标记阳性细胞MCAO、Sham+MCAO、IP+MCAO三组与Sham组间均有统计学差异(P<0.01);MCAO、Sham+MCAO两组与IP+MCAO间均有统计学差异(P<0.01);而MCAO和Sham+MCAO两组间无统计学差异(P>0.05)。结论:SD大鼠急性脑梗死可以引起大鼠脑内海马区SGZ自体神经干细胞的增殖;SD大鼠IPC可促进大鼠脑梗死后海马区SGZ自体神经干细胞的增殖,并能改善其神经功能缺损症状。第二部分δ阿片受体(DOR)在大鼠脑缺血耐受中的作用研究目的:观察大鼠脑缺血耐受(IP/IT)模型中d阿片受体(DOR)、Bax、Bcl-2mRNA的表达水平,探讨DOR在脑缺血耐受中的作用。方法:采用二次线栓法建立局灶—局灶性SD大鼠脑缺血耐受的动物模型。24只SD雄性大鼠随机分为:A、假手术(Sham)组;B、缺血(MCAO)组;C、假手术+缺血(Sham+MCAO)组;D、预缺血+缺血(IP+MCAO)组。大鼠脑梗死后7天处死,运用荧光定量PCR方法测定DOR、Bax、Bcl-2mRNA的表达水平。结果:在IP+MCAO组,DOR、Bcl-2mRNA的表达水平明显高于MCAO组和Sham+MCAO组,而BaxmRNA的表达水平明显低于MCAO组和Sham+MCAO组。MCAO、Sham+MCAO两组和IP+MCAO组均有统计学差异(P<0.01),而MCAO和Sham+MCAO两组间无统计学差异(P>0.05)。结论:SD大鼠IPC可促使DOR、Bcl-2mRNA水平的上调,并降低BaxmRNA的表达水平。第三部分三七通舒在大鼠脑缺血耐受和脑自体神经干细胞增殖中作用的研究目的:观察三七三醇皂苷(PTS)对大鼠脑缺血侧海马区自体神经干细胞增殖的影响,以及其对DOR、Bax、Bcl-2mRNA表达水平的影响。方法:在第一、第二部分的基础上,加一E组,即三七三醇皂苷+缺血(PTS+MCAO)组。在大鼠MCAO术前7天即予三七三醇皂苷100mg/kg/d腹腔注射,直至处死当日。结果:Zea-Longa神经行为学评分,大鼠脑梗死后3d、7d,MCAO、Sham+MCAO两组与PTS+MCAO间均有统计学差异(P<0.01),IP+MCAO和PTS+MCAO组组间无统计学差异(P>0.05)。SD大鼠脑梗死后7天BrdU标记阳性细胞计数Sham、MCAO、Sham+MCAO三组与PTS+MCAO间均有统计学差异(P<0.01),IP+MCAO和PTS+MCAO间两组间无统计学差异(P>0.05)。PTS对DOR、Bax、Bcl-2mRNA的表达没有影响,MCAO、Sham+MCAO、PTS+MCAO三组间无统计学差异(P>0.05)。结论:PTS可改善大鼠脑梗死后的神经功能缺损症状,促使大鼠缺血侧海马区SGZ自体神经干细胞的增殖,但对DOR、Bcl-2、BaxmRNA的表达水平未有影响。
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