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临床上在治疗骨缺损尤其是大段、大面积骨缺损时存在着一定困难,因创造出理想适合骨缺损区域骨生成的条件较为困难,治疗不当时往往导致骨不能愈合并最终发生骨不连,其中火器伤性骨缺损由于损伤处软组织损伤、缺如及异物不易清除等问题极易引起感染而导致骨髓炎,治疗起来更加具有挑战性。上世纪20年代,所有知名的战役中,发生的四肢肌肉骨骼损伤的概率为60%[1],而这些损伤往往是导致永久性残疾发生的重要因素[2],针对骨缺损,目前治疗的主要方法是进行自体骨移植,但当出现大面积骨缺损时往往存在来源不足等问题,组织工程骨的出现为火器伤性骨缺损的治疗开辟了新的道路,其中心内容围绕着种子细胞,细胞载体及成骨因子三方面展开,尽管目前有很多相关研究,但还未有任何一种理想状态下的可与自体骨移植相媲美的人工骨出现,而在治疗火器伤性骨缺损时,由于损伤的特殊性,则对骨移植材料要求更为苛刻,因此开发出合适的人工骨移植材料是目前研究的主要任务,本实验用物理化学结合的方法制备的部分脱蛋白小牛异种骨作为移植支架,复合羊自体红髓构建骨组织工程移植材料来修复绵羊胫骨中段临界骨缺损,观察成骨能力和免疫排斥反情况,并对火器伤骨缺损处是否能进行一期植骨进行讨论,为火器性骨缺损的治疗提供治疗的替代方法和实验依据。目的利用羊胫骨枪伤骨缺损模型,探讨异种牛部分脱蛋白骨复合自体红髓作为骨组织工程移植材料的促骨生成能力及火器伤后骨缺损处是否能进行一期植骨等问题,为火器伤骨缺损的早期治疗提供新的理论依据和方法。方法(1)将小牛骨切割成合适大小的骨条,参考文献中的方法制备部分脱蛋白小牛异种骨,并用Co60照射后放入-80℃超低温冰箱冷冻保存,用HE染色在光镜下观察骨支架中的脱细胞祛抗原情况,并用扫描电镜观察并测定材料的孔径大小和孔隙率。(2)新疆细毛羊24只,雌雄不限,按随机数字表分为A,B,C,D四个组,每组6只,用初速度为320m/s的7.7式手枪在每只羊的右侧胫骨中段造成贯通伤,伤后6小时内完成清创并于术中制造出平均长度为2.5cm的骨缺损,在缺损处行一期植骨内固定,其中A组缺损处植入自体骨(自体骨组),B组植入羊自体红骨髓复合异种牛部分脱蛋白骨(支架复合红髓组),C组单纯植入异种牛部分脱蛋白骨(单纯异种骨组),D组缺损区什么都不植(空白对照组),前三组为实验组,最后一组为对照组,术后观察实验羊的术后活动情况及生命体征的变化,术后一周应用抗生素预防感染并测量记录肛温变化。(3)于术后4、8、12、16周对各组绵羊行X片拍摄,最后一次拍摄于处死羊后进行,观察缺损处骨痂的生长情况,于16周时处死绵羊取患肢胫骨进行大体观察、组织学检查、MicroCT骨密度检查及骨密度等检测分析。结果(1)新制备的部分脱蛋白小牛异种骨支架长约2.5cm,肉眼观呈白色蜂窝状,无软组织及异物残留,光镜下观察骨小梁完整,小梁中的大部分骨细胞消失,原细胞存在部位呈空泡状,少量细胞存留但核固缩坏死,失去活性。电镜下观察该材料具有天然的孔状结构,各孔之间互通性良好,用软件测量材料的孔隙率接近80%。(2)实验组术后3天患肢可落地,但不可承重,2周后可部分负重,但仍跛行,4周后可正常活动,空白组羊16周中始终跛行。术后观察患肢术区切口恢复良好,共有3例发生感染,清创后发现手术切口内橡皮引流片残留,将此3只羊剔除实验组并重新选3只入组未有感染发生。(3)术后16周空白对照组骨缺损处未成功修复,有些有少量骨痂生成考虑术中骨膜未清除干净所致,实验组X线、骨密度、生物力学和组织学检查结果显示,A组>B组>C组>D组,其中A组与B组比较无明显统计学差异(P>0.05),A、B组与C、D组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)本实验所制备的异种牛骨支架孔隙率好,免疫原性低,细胞等抗原类物质清除的较为干净。植入后自体红髓复合牛异种部分脱蛋白骨的成骨效果与自体骨移植效果相近,且来源广泛,价格低廉,因此,此种复合材料可以当做较为理想的组织工程材料。(2)在所有的实验动物中,并未出现明显的缺损区感染现象,证明枪伤后一期植骨并进行骨折内固定在动物实验中是可行的,但真正应用于人还需进一步的临床实验加以证明。