鹌鹑源大肠杆菌分离鉴定及耐药基因、毒力基因检测

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近年来,重庆市、眉山市、成都市等地鹌鹑养殖产业不断发展,养殖方式逐渐向规模化集约化转变的过程中,鹌鹑感染大肠杆菌导致死亡的现象依然时常出现。大肠杆菌作为一种条件性致病菌,是养禽业中引起家禽致病的主要病原菌之一,主要用抗菌药物进行防治。由于在养殖业中抗菌药物长期被过量或违规使用,导致了大量大肠杆菌耐药株的产生,给此种疾病的防治带来一定程度上的困难,所以对鹌鹑源大肠杆菌的耐药性和致病性的监测分析尤为重要。本研究通过使用MAC、EMB培养基培养分离了重庆市、眉山市、成都市等地的鹌鹑源大肠杆菌,再进行形态学鉴定和特异性PCR鉴定,于2018~2019年间从重庆市、眉山市、成都市采集的120份病死鹌鹑中分离出72株大肠杆菌。采用K-B纸片法对分离菌进行耐药性检测,结果显示72株鹌鹑源大肠杆菌对20种抗菌药物耐药率介于27.78%~100%,对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢氨苄、头孢唑林、头孢呋辛、头孢他啶、四环素呈现高度耐药,耐药率均为100%;对哌拉西林、头孢拉定、环丙沙星、丁胺卡那、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、米诺环素、复方新诺明、多黏菌素B耐药率超过50%;对诺氟沙星和氧氟沙星的耐药程度较低,耐药率低于50%。进一步检测分离出的72株鹌鹑源大肠杆菌的耐药基因和毒力基因携带情况,重庆、眉山、成都等地鹌鹑源大肠杆菌中共检测到TEM、OXA、qnr D、qnr S、oqx A、oqx B、arm A、tet A、tet B、tet C、sul1、sul2、sul3、flo R等14种耐药基因,其检出率分别为26.39%(19/72)、12.5%(9/72)、45.83%(33/72)、44.44%(32/72)、19.44%(14/72)、16.67(12/72)、16.67%(12/72)、100%(72/72)、27.78%(20/72)、9.72%(7/72)、23.61%(17/72)、48.61%(35/72)、29.17%(21/72)、75%(54/72),其中tet A、flo R基因检出率最高;在各地鹌鹑源大肠杆菌中共检测到STa、STb、ast A、stx1、eae、irp2、aaf A等7种毒力基因,检出率分别为44.44%(32/72)、13.89%(10/72)、6.94%(5/72)、100%、15.28%(11/72)、45.83%(33/72)、18.06%(13/72),其中stx1基因在重庆、眉山、成都等地区均为100%检出率。通过对重庆市、眉山市、成都市等地鹌鹑源大肠杆菌进行分离鉴定,进一步研究其携带耐药基因和毒力基因情况,对流行病学研究具有重要意义,为今后研究细菌性疾病的防治提供重要理论依据,也有助于提高公共卫生安全。
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