【摘 要】
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胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）,是炭疽菌属（Colletotrichum）真菌的重要类群,寄主类型广泛,为世界性病害。胶孢炭疽菌可侵染多种重要农林经济作物,引起植物炭疽病,对我国经济造成巨大损失。本文以21株胶孢炭疽菌为研究对象,通过接种辣椒果实进行致病力强弱测定,进一步对强中弱致病力代表性菌株进行Biolog表型分析以及转录组学分析,从生理生化以及分子
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胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）,是炭疽菌属（Colletotrichum）真菌的重要类群,寄主类型广泛,为世界性病害。胶孢炭疽菌可侵染多种重要农林经济作物,引起植物炭疽病,对我国经济造成巨大损失。本文以21株胶孢炭疽菌为研究对象,通过接种辣椒果实进行致病力强弱测定,进一步对强中弱致病力代表性菌株进行Biolog表型分析以及转录组学分析,从生理生化以及分子角度分析致病力差异。研究结果如下:1、致病力测定本研究以不同寄主分离出的21株胶孢炭疽菌为研究对象,通过对朝天椒艳椒425果实进行离体接种试验,发现供试菌株中12株表现为强致病力、5个菌株表现为中等致病力,4个菌株表现为弱致病力菌株。2、Biolog表型分析从3种致病力菌株中各选1个菌株作为代表性菌株,从碳氮源物质利用、物质合成途径以及对化学物质敏感性三个方面进行Biolog表型对比分析,结果显示,对碳氮源物质代谢利用情况测定中,强致病力菌株对碳氮源物质的代谢利用率高,代谢利用种类多,且强致病力菌株较其他两种致病力菌株多代谢31种碳源物质和25种氮源物质;对生物合成途径测定中,三者均能利用的化学物质对强致病力菌株的促进作用要高于其他两菌株;对化学物质敏感性测定中,中等致病力菌株和弱致病力菌株对抗生素的敏感性要高于强致病力菌株。3、不同致病力胶孢炭疽菌菌丝转录组测序分析对三种致病力菌株菌丝进行转录组分析及荧光定量PCR验证,三种致病力菌株菌丝转录组测序结果表明,共有2,702个、2,236个和1,537个差异基因,其中上调差异表达基因分别为1,369个、1,284个和695个,下调差异表达基因分别为1,333个、952个和842个。差异表达基因的GO功能分析中,三组富集到基因数目最多的类别均为分子功能类别,其次为细胞组分类别,最后为生物过程,且在各功能分类中强致病力菌株富集到的基因数量高于弱致病力菌株。差异表达基因的KEGG分析表明,三组分别富集到108、103和83条通路,富集基因数最多的通路皆为代谢途径,差异表达基因依次有546、347和180个。在差异表达基因中的TOP20基因筛选出cat B、LAC1和ALDH等8个基因进行后续的荧光定量PCR验证。4、艳椒425果实病部组织内病原菌测序分析对艳椒425果实病部组织内病原菌进行转录组分析及荧光定量PCR验证,三组转录组测序结果表明,共有差异表达基因2,329个、1,880个和967个,其中上调差异表达基因分别为1,435个、1,101个和530个,下调差异表达基因分别为894个、779个和437个。差异表达基因的GO功能分析中,三组富集到基因数目最多的类别均为分子功能类别。差异表达基因的KEGG分析,三组分别富集到109、74和98条通路,富集基因数最多的通路皆为代谢途径,差异表达基因依次有351、123和273个。在差异表达基因中的TOP20基因筛选出aceA、PMG和Cx等等8个基因进行后续的荧光定量PCR验证。
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