长非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一种核酸长度超过200nt且不具有蛋白质编码功能的RNA分子。近年来越来越多的研究证明,lncRNAs的分布及表达具有组织和细胞的时空特异性,参与了细胞的增殖、凋亡、迁移、分化等众多重要过程,其表达异常和多种人类疾病的发生密切相关。新近研究显示,lncRNAs可影响糖尿病高危基因的表达,提示lncRNAs可能与糖尿病的发生密切相关。母系表达基因3（maternal expression gene3,MEG3）属于母源性的印迹基因,位于人14号染色体,编码产物为lncRNAMEG3。小鼠Meg3基因与人源的具有同源性。已有研究表明lncRNAMEG3在2型糖尿病患者胰岛中表达异常,但其在胰岛细胞功能中的作用机制研究尚未见报道。本课题组运用实时荧光定量 PCR（Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qPCR）技术检测lncRNAMeg3在小鼠不同组织和细胞中,以及在非肥胖性糖尿病（non-obese diabetic,NOD）小鼠和db/db小鼠胰岛中的表达水平。通过不同糖浓度处理MIN6细胞和原代小鼠胰岛细胞后,检测lncRNA Meg3的表达。采用特异性小RNA干扰方法在细胞和活体水平特异性下调lncRNA Meg3的表达,并通过噻唑蓝（MTT）、流式细胞术、放射免疫分析法（radioimmunoassay,RIA）、蛋白免疫印迹（western blotting）等技术检测MIN6细胞增殖、凋亡以及胰岛素合成和分泌的情况。通过小鼠腹腔注射葡萄糖耐受实验（intraperitoneal glucose tolerancetest,IPGTT）、酶联免疫吸附剂测定方法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、免疫组织化学等方法在活体水平检测lncRNA Meg对胰岛素合成及分泌的影响。通过RNA结合蛋白免疫沉淀技术（RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RIP）、染色质免疫共沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation,ChIP）等方法探讨lncRNA Meg3对胰岛素合成调控的分子机制。实验结果显示,受糖浓度调控的lncRNA Meg3差异性表达于小鼠胰腺组织中,主要定位于胰岛细胞中。在糖尿病小鼠胰岛中表达显著下调。提示lncRNA Meg3与胰岛功能可能存在重要联系。在胰岛细胞中特异性干扰Meg3后,细胞活力下降、凋亡增加,胰岛素合成、分泌减少,胰岛素合成相关转录因子V-MAF肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因家族蛋白A（v-Maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene family,protein A,MafA）、胰腺和十二指肠同源盒 1（Pancreatic and duodenal homeobox 1,Pdx-1）表达下调。免疫组化结果显示胰岛素阳性细胞面积减少。通过生物信息学分析、RIP和ChIP结果显示,lncRNA Meg3在小鼠胰岛中通过结合EZH2,下调MafA负性调控转录因子RAD21黏粒蛋白复合体组分（RAD21 cohesin complex component,Rad21）/染色质结构稳定因子 3（structural maintenance of chromosomes 3,Smc3）/SIN3A 转录调控因子（transcriptional regulator,SIN3A,Sin3α）,影响了胰岛素的合成。本课题组证实了 lncRNAMeg3对于小鼠胰岛功能维持必不可少,其表达缺失可导致胰岛素的合成及分泌异常。在糖尿病小鼠胰岛中表达下调,也提示了lncRNA Meg3可能参与了糖尿病发生的过程中。本研究旨在通过细胞水平和活体水平两个层面,探讨lncRNA Meg3在小鼠胰岛功能中的作用,进一步丰富和完善胰岛细胞功能的网络调控机制。