OK-432肿瘤细胞疫苗抗肿瘤效应的研究

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目的研制新型OK-432肿瘤细胞疫苗,并观察其对DBA/2小鼠舌癌的抗肿瘤效应,为口腔癌的临床治疗提供新方法。方法1.以glutaraldehyde(GA)为交联剂,使KLN-205细胞与OK-432产生交联,剔除剩余物制成OK-432疫苗;2.采用相位差显微镜和电子显微镜观察确认OK-432疫苗的表面形态及其变化;3.采用相位差显微镜观察台盼蓝染色后OK-432肿瘤疫苗中KLN-205细胞的存活情况;4.将DBA/2小鼠随机分为四组,每组20只,分别右侧腹腔皮下注射生理盐水、OK-432、灭活的KLN-205细胞、OK-432疫苗,接种KLN-205肿瘤细胞后观察对比舌癌发生率及瘤体大小,并用统计学分析其结果。5.免疫组织化学染色观察舌组织中CD4及CD8的分布。结果1.OK-432肿瘤疫苗位相差显微镜观察可见:OK-432疫苗组,OK-432呈放射状吸附于肿瘤细胞周围;OK-432肿瘤疫苗台盼蓝染色镜下未见活细胞;2. OK-432肿瘤疫苗的电子显微镜可见:OK-432疫苗组,OK-432吸附于细胞膜表面,导致细胞膜隆起变性,细胞膜与OK-432菌膜间可见微通道;3.OK-432疫苗组肿瘤发生率与其他三组比较,差异均有统计学意义(P<0.001),且发生率均小于其它三组。KLN-205组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);4.肿瘤大小除KLN-205组与对照组间差别没有统计学意义(P=0.094)外,其余各组间差别均有统计学意义,其中OK-432疫苗组肿瘤体积均小于其他三组。5.免疫组织化学结果:OK-432疫苗组肿瘤接种24hrs后,KLN-205肿瘤细胞周围有大量的淋巴细胞(CD4、CD8)浸润。结论1.这种以戊二醛(GA)为交联剂,将佐剂OK-432交联于KLN-205细胞膜表面,同时灭活肿瘤细胞而制备肿瘤疫苗的方法具有一定的可行性;2.OK-432肿瘤细胞疫苗能降低肿瘤发生率、抑制肿瘤生长,具有一定的抗肿瘤效应,是口腔癌免疫治疗的重要方法之一。
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