山阴还阳参资源分布及不同药用部位药效与物质基础研究

来源 :山西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:single654321
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目的借第四次全国资源普查之机对山阴县区域还阳参药材的分布特点及药材蕴藏量进行考察,同时探讨还阳参地上部分及根部化学成分与药效,为合理利用与推广还阳参这一山西特色药材提供科学依据。方法1山阴还阳参野生资源调查:按照全国第四次中药资源普查方案,采用踏查及实地样方调查的方法,对山阴县还阳参资源分布情况和蕴藏量进行实地调查,了解该生态区还阳参资源的分布特点和药材蕴藏量。2还阳参不同药用部位化学成分研究:采用高效液相色谱法测定绿原酸含量,紫外分光光度法测定多糖含量,热浸法测定浸出物含量;并且采用1H-NMR植物代谢组学技术,对还阳参不同部位NMR氢谱进行分析,以及指认其化学成分,并对不同药用部位差异化合物进行筛选,整体评估还阳参不同部位化学成分差异。3还阳参不同药用部位药效对比研究:采用小鼠浓氨水引咳、内毒素致大鼠炎症、环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型对还阳参不同药用部位的药效进行研究,对比其不同部位药效可能存在的差异。结果1还阳参资源分布情况和蕴藏量调查山阴县地处山西省北部,全县面积1657平方千米,依据普查方案,按其植被类型划分为草丛、草原、草甸、灌丛、阔叶林5个代表区域48个样地共240个样方套,通过调查发现还阳参在草丛、草原、灌丛、阔叶林四个代表区域均有分布,山阴县境内还阳参分布面积约为8.954Km~2,药材储量约为50.4189t。其中各生态代表区还阳参药材蕴藏量从高到低依次为灌丛﹥草原﹥草丛﹥阔叶林。2还阳参不同药用部位化学成分研究2.1还阳参不同药用部位化学成分含量分析还阳参地上部分与全草绿原酸含量接近均在0.5%以上,而其根部绿原酸含量较少在0.095~0.333%之间;还阳参根部多糖含量均在11.90%以上且高于全草及地上部分,还阳参地上部分多糖含量较低在0.12~3.96%之间。6~7月份采集的还阳参其根部浸出物含量均在36.98~52.54%之间,且高于地上部分含量,8~9月份还阳参地上部分浸出物含量有所上升,在29.51~49.03%之间,并高于根部。2.2还阳参不同药用部位指纹图谱的建立还阳参地上部分、根部UPLC图谱出峰数目相差较大,相同成分含量也有较大差异,还阳参地上部分共标定了22个共有峰,各批相似度相似度均在0.977以上,还阳参根部共标定了5个共有峰;各批药材之间相似度较低在0.035~0.982之间。2.3基于~1H-NMR代谢组学技术分析还阳参不同药用部位化学成分差异通过利用~1H-NMR的代谢组学技术对还阳参全草及不同部位化学组成进行了全面的分析,共指认出31个化合物,多元统计分研究结果表明还阳参全草及不同部位化学成分存在明显差异,并筛选出绿原酸、乳酸、缬氨酸、丙氨酸、赖氨酸、蔗糖、谷氨酸、α-葡萄糖、乳酸等9个差异代谢物。还阳参地上部分及根部与全草相比较含量均具有差异的化合物有绿原酸、乳酸、缬氨酸、赖氨酸、蔗糖,其中绿原酸、乳酸、缬氨酸、赖氨酸含量在还阳参地上部分含量高于其在全草及根部的含量,蔗糖含量在还阳参根部含量最高并高于其在全草及地上部分的含量;还阳参根部与全草含量存在差异的化合物有谷氨酸、α-葡萄糖、乳酸、丙氨酸且在根部的含量均低于在全草中的含量。3还阳参不同药用部位药效学研究3.1还阳参不同药用部位止咳作用比较与空白组比较,模型组小鼠咳嗽潜伏期显著延长,咳嗽次数显著增加,BALF中的免疫因子IL-4、IgE的含量均显著升高(P<0.05)。给药后,与模型组比较,阳性对照组、还阳参全草组、地上部分组、根部组,咳嗽潜伏期显著增长(P<0.01)、2min内咳嗽次数显著减少(P<0.01);还阳参各部位可显著下调氨水引咳小鼠肺泡灌洗液中IL-4的含量(P<0.05);其全草和地上部分肺泡灌洗液中IgE含量显著下降(P<0.05)。提示还阳参全草组、地上部分组、根部组对小鼠氨水引咳模型均具有一定的镇咳作用,可能与抑制肺组织中IL-4和IgE的生成有关。3.2还阳参不同药用部位抗炎作用比较与空白组相比,模型组的免疫因子IL-1β、IL-6的含量均显著升高(P<0.01),说明造模成功。给药后,与模型组相比阳性对照组、还阳参全草组、地上部分组、根部组,可显著降低血液中白细胞的含量(P<0.01),可显著降低血清中IL-1β、IL-6的含量(P<0.01)。提示还阳参全草组、地上部分组、根部组对内毒素所致炎症均具有治疗作用。其中,还阳参全草治疗作用最强,还阳参地上部分次之,根部治疗作用最差。3.3还阳参不同药用部位对环磷酰胺诱导的免疫低下模型小鼠的影响与空白组相比,模型组中的免疫因子TNF-α、IgG的含量均显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义(P<0.05)。给药后,阳性对照组、还阳参全草组、根部组对TNF-α具有显著下调作用(P<0.05);阳性对照组、还阳参全草组对IgG均具有显著下调作用(P<0.05)结论还阳参植物在山阴县的草丛、草原、灌丛、阔叶林四个代表区域均有分布,但其分布区域多集中于山阴县的南北两地,分布范围较窄且蕴藏量也较低,提示需进一步了解还阳参的生长特性,提高其资源储量。还阳参全草、地上部分及根部均含有绿原酸,但其地上部分明显高于根部,而多糖含量则根部明显高于地上部分,从成分含量、差异提示地上部分与根部功效可能存在一定差异。浸出物含量随着植物生长时限的不同地上部分与根部呈现一定的变化波动,地上部分浸出物含量由低到高,而根部含量由高到低,这符合植物生命生长发育规律,也对还阳参采集有一定指导意义。通过比较不同部位的止咳、抗炎及免疫调节作用,表明不同部位具有相同作用,但作用强度有所差异。药效对比结果与成分研究结果比较相符,通过上述研究为还阳参质量控制及临床疗效研究提供基础以及合理利用与推广还阳参这一山西特色药材提供科学依据。
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