大鼠脑缺血预处理后GFAP、NGF、BDNF、Nestin的表达及对神经功能的影响

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脑缺血再灌注所致的脑梗死具有很高的致残率,是导致后天残疾的主要诱因[1],临床上用于治疗急性脑梗死的手段相当匮乏,经过前人研究发现,重组组织纤维酶原复合物(rtPA)即溶栓治疗对于治疗急性脑梗死效果较好,已经被食品及药品管理局批准在临床上大量使用。随着溶栓治疗的推广及使用,其缺点也逐渐显露,受时间窗、手术史、年龄、病人身体情况等各方面的限制,不能使每个病人都能及时接受溶栓治疗,且由于医疗设备、条件的限制,大部分地方基层医院并不能顺利开展动脉溶栓、动脉取栓术,使很大一部分病人因为不能得到及时救治而耽误病情,给家庭和社会带来极大不便。现如今,我国已进入老龄化社会,缺血性脑卒中的发病率也呈上升趋势,为了减少病人痛楚,使社会稳定、家庭和谐,临床上急需寻找一种根治急性脑梗死的方法。本实验通过对SD雄性大鼠进行缺血预处理,观察缺血后各个时间点脑组织梗死区的胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、Nestin的表达水平及这四个因子与神经胶质细胞之间的联系,为进一步临床研究提供理论依据。将SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组(ischemia and reperfusion group,IR)及脑缺血预处理组(ischemic preconditioning group,IP)。IP组使用线栓法使大鼠缺血10min,于3天后对该大鼠制备脑缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。IR组3天前仅暴露颈部血管,再制作大鼠MCAO模型,假手术组仅暴露颈部血管。根据神经功能缺损法分别对缺血再灌注后2h和24h的大鼠进行评分,采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride,TTC)染色法测定大鼠脑缺血再灌注后24h,48h,72h,7d,14d的脑梗死体积,通过苏木精一伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察脑组织梗死区细胞的形态变化,通过免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测各组梗死区GFAP、NGF、BDNF、Nestin的阳性细胞数表达变化。与假手术组相比,IP组与IR组的缺血再灌注大鼠神经功能评分下降;与IR组相比,IP组在术后的神经功能缺损评分明显降低,且梗死体积减少(P﹤0.05),各个时间点的GFAP、NGF、BDNF、Nestin表达量明显上调(P﹤0.05),有显著性差异。综上所述,脑缺血预处理能有效保护缺血再灌注损伤,可能是通过促进GFAP、NGF、BDNF、Nestin的阳性细胞表达,进而使神经干细胞增殖分化,促进神经再生而实现的。
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