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研究背景:肺移植是治疗终末期肺疾患的唯一方法,目前临床应用的肺保存技术所能提供的安全缺血时间有限,成为阻碍肺移植发展的关键因素。为进一步改进供肺保存方法,减轻肺移植后缺血再灌注损伤,国内外进行了大量的研究,以求延长供肺的保存时间。由于缺乏系统对供肺保存及缺血再灌注损伤的机理在蛋白质水平的研究,目前对供肺保护的基因治疗仅引入几个无特异性的保护基因加以研究与验证。蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象,从整体的角度,分析细胞内动态变化的蛋白质组成与活动规律。随着蛋白质组学技术的进步与提高,其已逐渐应用到临床疾病研究的各个领域。国内外已开始对肺部疾病的蛋白质组学研究,但应用蛋白质组学技术在蛋白质分子水平进行供肺保存的缺血再灌注损伤机理研究尚未见报道。 目的:应用比较蛋白质学方法分析大鼠肺缺血再灌注肺组织与对照组肺组织的差异蛋白质表达,在蛋白质分子水平探讨移植肺缺血再灌注损伤机理,为移植肺缺血再灌注损伤的预防和治疗及供肺保存提供新的理论支持。 方法:(1)本研究选用40只SD大鼠,随机分为I/R组(实验组n=20)建立模拟自体左肺原位移植模型,在缺血再灌注后4小时获取肺组织标本及配对C组(正常对照组n=20)大鼠肺组织标本,经HE和VG染色后进行组织形态学比较研究并测定肺组织湿/干比值、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;(2)在第一步的基础上,进行比较蛋白质组学研究:即利用固相pH梯度