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研究目的： 急性排斥反应对移植物的近远期存活具有十分重要的影响。急性排斥反应的诊断，移植肾穿刺活检是金标准，但其固有的有创性使其不能早期发现、动态监测急性排斥反应。随着免疫学、分子生物学的发展，从急性排斥反应发生的中心环节—T细胞活化来监测急性排斥反应成为可能。故本研究的目的：（1）进行大鼠肾脏移植的应用解剖研究，为大鼠肾移植术式设计提供解剖学依据；（2）建立简便、成功率高的大鼠肾移植模型；（3）建立大鼠肾移植急性排斥反应模型，了解大鼠肾移植急性排斥反应病理进程；（4）定量检测大鼠肾移植术后移植肾、外周血单核细胞perforin、FasL、CD40L等免疫活化基因的表达，探讨它们与急性排斥反应的关系，建立无创性诊断急性排斥反应的新方法。 材料与方法： 一、大鼠肾移植的应用解剖研究 36只SD大鼠，体重250～280g，雌雄各半，30只用于解剖研究，6只用于铸型标本制作。采用活体解剖和制作铸形标本两种方法，观察腹主动脉及其分支、后腔静脉及其属支的走行，活体解剖时同时测量有关血管口径。 二、大鼠同种异体，肾移植动物模型的建立 SD大鼠为供受体。供体切取范围包括左肾、左肾动静脉、左输尿管、膀胱、腹主动脉（腹腔动脉以下至左肾动脉下方约0.8cm）、后腔静脉，后腔静脉反转固定于自制的Cuff管上。受体动脉重建：受体暴露左肾动脉以后全长腹主动脉，于中点处剪断，以硬膜外导管作内支架，连续吻合供受体腹主动脉，吻合上口时，硬膜外导管由供体腹主动脉下方开口穿入，上方开口穿出进入受体上段腹主动脉;吻合下口时，硬膜外导管由肠系膜前动脉穿出。动脉重建完毕后，拔出硬膜外导管，结扎肠系膜前动脉。静脉重建:供体后腔静脉Cuff套入受体左肾静脉，环扎。输尿管重建:供体膀肤瓣与受体膀肤全层缝合。 三、大鼠肾移植急性排斥反应动物模型的建立 异基因移植组由Wistar大鼠为供体，雄性SD大鼠为受体。同基因对照组供受体均为SD大鼠。按第二部分描述的方法进行肾移植，术后第l、3、5、7天取移植肾组织，进行HE染色、Masson染色、PAS染色、PASM染色，光镜下观察病理改变，参照Banff97标准进行诊断，根据Watanabe的方法进行急性排斥反应严重程度的半定量评分。 四、荧光定量RT一PcR检测peribrin、FasL、CD40Lm丑NA的表达 同基因对照组和异基因移植组均为7例肾移植。术后第五天，采取受鼠移植肾标本和外周血标本，一部分移植肾标本行病理学检查，病理诊断和评分同第三部分。采用荧光定量PCR方法检测另一部分移植肾标本和外周血标本peribrin、FasL、cD40L mRNA的表达水平。结果: 一、大鼠肾移植的相关应用解剖 腹主动脉的主要分支包括腹腔动脉、肠系膜前动脉、肾动脉、骼腰动脉、腰动脉等。腹腔动脉起始处腹主动脉直径 2.28士0.巧2 .10一2一55</sup>;腹腔动脉、肠系膜前动脉两者间距3.28士0.312.75一3.60</sup>;左肾动脉下方0.scm处腹主动脉直径1.37士0.13一5一l.55rnm。肠系膜前动脉起始处直径一29士o.ogmtn（1，15一1.45nun）。左肾动脉起始处直径0.79士0.090 .65一1 .00</sup>。腹部后腔静脉的属支 -4-包括腰静脉、骼腰静脉、精索内静脉或子宫静脉、肾静脉等。左肾静脉入后腔静脉处直径2.75士0.202 .65一3.3Otnm，中点直径2.18土0.40nun（1.75一3.oon皿n），长度9.45士l.03tnm（8.30一11.6omrn）。 二、大鼠肾移植新术式的效果 整个移植费时160 min，热缺血时间<5s，冷缺血时间<80min，血管吻合时间40而n。引例手术中，35例成功，手术成功率85.4%（35/41）。术后淋巴漏2例，尿漏1例，输尿管入膀肤处狭窄1例，术后并发症发生率n.4%（4/35），并发症发生率低于同类报道。 三、大鼠肾移植急性排斥反应动物模型的建立 术后第1、3、5、7天异基因移植组和同基因对照组的半定量评分分别为（0.5士0.54）、（1.33士0.82）、（3.50士1.05）、（4.33士0.52）和（0.33士0.52）、（0.67士0.52）、（0.67士0.52）、（0.67士0.52）。异基因移植组与同基因对照组评分有统计学意义印<0.05)，异基因移植组明显高于同基因对照组。异基因移植组中两两比较结果，第3、5、7天评分与第1天评分有显著性差异印<0.05)，第3天与第5、7天评分有显著性差异印<0.05)，第5天和第7天评分无统计学意义印>0.05)。同基因对照组各天的评分无统计学意义印>0 .05)。 四、移植肾、外周血单核细胞pe而rin、FasL、cD40L mRNA表达与急性排斥反应的关系 异基因移植组移植肾病理评分2一5分（3 .43士0.98），同基因对照组移植肾病理评分0一1分（0 .71士0.49）印=0.099)。同基因对照组移植肾标本中perforin、FasL、CD4oL mRNA的表达水平很低，分别为（0.36士0.27）X106拷贝/ug胭A、（0.09士0.04）X一06拷贝/ug朋A、（0.04士0.0一）x 106拷贝/ug RNA，而异基因移植组peribrin、FasL、CD40L mRNA的表达水平明显增高，分别达到（23.37士10.85）X 106拷贝/ug胭A、(2.5