实时心肌声学造影定量评价缺血后适应对微循环的影响

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目的:评估实时心肌声学造影用于兔缺血再灌注心肌评价微循环的可行性,并进一步探讨缺血后适应对无复流有无影响。方法:60只新西兰大白兔随机分为3组,即假手术组(Sham组)、缺血再灌注对照组(ischemia reperfusion,IR组)和缺血后适应组(ischemic postconditioning,IPostC组),每组20只。建立兔在体心脏缺血再灌注模型,处理方式如下:Sham组的缝线穿过心肌但不结扎,观察3小时关胸;IR对照组结扎前降支(LAD)60分钟,再灌注120分钟后关胸;IPostC组同样是结扎LAD60分钟后再灌注120分钟,在再灌注之初进行开通30s/缺血30s的连续4次循环。术中全程监护心电,记录手术前后心率、心律和ST段改变情况。各组兔子在术前、结扎后3小时及术后1周留取静脉血,离心后检测肌钙蛋白、高敏C反应蛋白、超氧化物歧化酶、丙二醛等指标。术后继续饲养兔子1周,行常规超声心动图和心肌声学造影检查,取得图像后脱机应用EchoPAC-7超声图像工作站进行分析。处死动物取心脏,其中的10只处死后立即用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,计算心肌梗死面积,另外10只用10%甲醛固定后作光学显微镜检查。结果:1.共领取73只新西兰大白兔,最后纳入实验分析的为60只,2只死于气胸,1只死于肋间动脉出血,死亡率分别为2.74%和1.37%,术后无感染或死亡。2.各组兔子之间性别、年龄和体重无差异(P>0.05)。3.各组兔子结扎后心率稍有增快,与术前比无明显差异(P>0.05);结扎后10分钟,IR组和IPostC组的ST段平均抬高3.75±0.72mm、3.59±0.63mm,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。再灌注后ST段逐渐回落,两组在再灌注10分钟时ST段平均回落分别为1.64±0.84mm、2.95±0.76mm,差异有统计学意义(P<0.05);再灌注心律失常现象在两组之间无明显差别(P>0.05)。4.结扎后3小时,IR组和IPostC组肌钙蛋白I(cTnI)明显升高,两组之间比较无差异(2.17±0.33ng/ml比2.03±0.25ng/ml,P>0.05);高敏C反应蛋白(hsCRP)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的浓度亦明显升高,两组之间比较有统计学差异(P<0.05),其中IR组的hsCRP和MDA较IPostC组明显高(分别为7.94±1.20μg/ml比4.55±0.90μg/ml,2.46±0.58μmol/ml比0.94±0.34μmol/ml),SOD浓度较IPostC组明显低(17.13±5.75ng/ml比40.87±9.93ng/ml,P<0.05)。术后一周,IR组的cTnI和MDA浓度较IPostC组高,SOD浓度较IPostC组低,差异有统计学意义(分别为1.65±0.25ng/ml比1.09±0.17ng/ml,2.52±0.57μmol/ml比1.02±0.28μmol/ml,16.50±5.89ng/ml比40.58±9.16ng/ml, P<0.05);hsCRP浓度在两组之间无明显差异(0.78±0.17μg/ml比0.74±0.11μg/ml,P>0.05)。5.术后1周常规心超发现IR组和IPostC组左室舒张末内径(left ventricular enddiastolic diameter,LVEDD)无明显差异(18.6±5.2mm比17.4±3.8mm,P>0.05);IR组的左室收缩末内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)与IPostC组之间无明显差异(13.1±2.4mm比12.6±5.1mm,P>0.05);IR组的左室射血分数(leftventricular ejection fraction,LVEF)稍降低,与IPostC组无明显差异(59.5±7.9%比62.4±8.2%,P>0.05)。6.行实时心肌声学造影时兔无不良反应,未见心律失常,前、后心率无明显减慢或增快;ST段未见明显偏移。7.组内不同节段之间的心肌声学造影分析,Sham组各节段之间A值、β值和A×β值均无明显差别(P>0.05);IR组的前壁、侧壁及前间隔与后壁、下壁及后间隔两两比较,A值、β值和A×β值均明显下降(P<0.05);IPostC组的前壁、侧壁及前间隔与后壁、下壁及后间隔两两比较,A值和A×β值明显下降(P<0.05),β值有增高,但无统计学意义(P>0.05)。对有灌注缺损的三个节段进行组间心肌声学造影分析,IR组与Sham组相比,A值、β值和A×β值明显下降(P<0.05);IPostC组与Sham组相比,A值和A×β值明显下降(P<0.05),β值无明显差异(P>0.05);与IPostC组比较,IR组A值、β值和A×β值均有明显下降(P<0.05)。8. TTC染色发现梗死部位集中在前壁、侧壁和前间隔部位,IR组梗死区心肌较IPostC组重,梗死百分比大,差异有统计学意义(22.0±3.42%比7.72±1.63%,P<0.05)。9.光镜检查表明IPostC组心肌损伤较IR组轻;各组兔心肌的毛细血管腔内未见有血栓或造影剂潴留。结论:1.“四线四结”联合胸肋关节离断开胸法,可显著减少气胸和肋间动脉出血发生率,关胸时离断面对位良好,有利于保持胸廓正常形态,减少术后并发症。2.利用心肌声学造影评价微循环,具有实时、微创、可定量分析等优点,本实验发现心肌声学造影可用于兔缺血再灌注模型,安全无副作用,图像清晰稳定。3.缺血后适应可显著减少再灌注损伤,降低炎症因子释放,减少心肌梗死面积。4.通过实时心肌声学造影的方法发现,缺血后适应有利于维持心肌血容量和血流速度,改善心肌微循环灌注,减少无复流。但目前研究结果尚存争议,值得进一步探讨。
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