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油豆角是在我国东北地区最受人们欢迎的优质蔬菜品种之一,因贮藏期短,限制了人们的食用。现以黑龙江特产白油豆角为研究对象,从贮藏期间腐烂的豆荚和未发病的豆荚中筛选出主要腐败菌和生物防腐菌,并对其进行生理生化和分子生物学鉴定,进一步对生物防腐菌与腐败菌的拮抗性进行研究,证明所筛选的生物防腐菌对油豆角主要腐败菌的抑制作用。结果如下:选取东北白油豆角,在室温贮存腐败后,分别采用稀释分离与划线分离的方法对腐败菌进行分离,共分离得到12株腐败菌。根据形态学特征判断主要为细菌、霉菌两类;对其腐败菌进行18S rDNA基因测序分析,确定腐烂变质的主要腐败菌为灰霉病菌(Botrytis cinerea)。从未腐烂的豆荚表面取样,采用稀释与划线分离的方法进行表面微生物的分离,得到8株细菌;再利用96孔板法进行油豆角生防菌的筛选;将12株腐败菌菌悬液分别接入96孔板中,再将所得8株菌分别接入孔板中在37℃培养48h后;将孔板菌悬液对应移入酶标板中在480nm进行吸光值测定,得到F3菌吸光值为0.338,抑菌效果最好。根据形态学、生理生化和16S rDNA基因测序分析,鉴定结果F3为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。经文献报导阴沟肠杆菌无明显急性毒性和致敏性。采用平板对峙实验对F3阴沟肠杆菌与腐败灰霉菌的接抗性进行研究,抑菌圈结果F3阴沟肠杆菌对腐败细菌的最大抑菌圈直径为1.17 cm。将F3阴沟肠杆菌与腐败菌灰霉菌共同培养48h,扫描电镜观察结果为F3阴沟肠杆菌能够抑制腐败菌灰霉菌菌丝生长,并出现灰霉菌菌丝细胞内含物外溢、菌丝扭曲变形等现象。为大量培养F3阴沟肠杆菌,以牛肉膏蛋白胨培养基为基础培养基,确定最优碳源为乳糖、氮源胰蛋白胨、无机盐KH2PO4:通过响应曲面法试验,确定最优培养基用量:乳糖为5g/L、胰蛋白胨为20g/L、KH2PO4为18g/L:培养条件的正交试验结果为:培养温度40。C、培养时间72h、pH7、接种量5%。在此条件下是,F3阴沟肠杆菌的活菌数为:6.13×106cfu/mL。