背景与目的：心源性猝死(sudden cardiac death,SCD)，是指平素健康或病情稳定的人，由于心脏的原因，引起的以骤然意识丧失为前驱症状的出乎意料的快速死亡。SCD的发生具有自发性、突然性和不可预测性，大多数SCD患者在毫无先兆的情况下突然发生，短时间内死于院外，并且很少有机会进行临床检查和救治，其死因经尸体解剖目前未发现有明确的形态学证据，一直是法医病理学死因鉴定的难题。本研究针对这一难题，选取法医病理实践中遇到的猝死病例，进行分类分组，旨在探讨不同诱因下如酗酒、争斗等应激事件中，心源性猝死的发病机制，寻找可靠地形态学依据。　　众所周知肥大细胞在急性超敏反应，如哮喘、荨麻疹等病理机制中发挥重要的作用，心源性猝死也为急性反应事件。肥大细胞在心性猝死中的作用引起我们课题组的重视，前期也进行了初步探讨。也有研究发现肥大细胞在动脉粥样硬化病变的发生发展中发挥一定作用，因此本研究把肥大细胞在心脏中的分布、活化和反应情况作为重点观察指标，通过珍贵的人体样本和动物实验进行研究。　　材料与方法：　　1、人体组织标本：查阅并收集汕头大学司法鉴定中心共36例病理尸体解剖的冠脉各分支和心肌组织标本（包括8例酒精相关心源性猝死组、10例精神应激相关心源性猝死组、18例非心源性猝死组），共计109支冠脉和84例心肌标本，对其进行组织病理学及免疫组织化学观察分析。　　2、建立小鼠急性酒精中毒模型：成年APOE基因敲除小鼠32只，随机分成急性灌酒组（16只）及对照组（16只）。灌酒组一次性以食用白酒灌胃，灌胃剂量为20ml/kg。对照组一次性灌入同等容积的自来水。灌胃2小时后解剖全部的32只小鼠，并获取心脏组织。　　3、苏木素-伊红染色（HE染色）：观察人体及动物模型心肌和冠脉标本的组织病理学改变。　　4、免疫组织化学检测：用类胰蛋白酶标记肥大细胞，检测人体冠脉及心肌组织中肥大细胞类胰蛋白酶表达，用肾素及肾素血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）抗体染色观察人体和小鼠心脏中的表达情况。　　5、丽春红S/维多利亚蓝复合染色（P/VB特殊染色）：能将冠脉血管的弹力纤维染成亮绿色，胶原纤维染成红色，平滑肌纤维染成黄色，使冠脉结构清晰、鲜明，便于观察冠脉的病变情况。　　6、肥大细胞甲苯胺蓝染色法：可以将肥大细胞标记出来，肥大细胞颗粒被染成紫红色，细胞核呈现为蓝色。　　7、统计分析：用SPSS19.0统计分析软件对实验结果进行分析，采用单因素方差分析、成组t检验、Pearson相关分析。　　结果：　　1、人体心脏的形态学观察：（1）HE染色：三组均有心肌肥大，冠脉有不同程度的粥样硬化性狭窄，酒精组及精神应激组的心肌纤维呈波浪状弯曲，心肌纤维断裂多于对照组；（2）P/VB染色：对照组内弹力纤维无明显脆性断裂，酒精组及精神应激组内弹力纤维中脆性断裂较多见。　　2、人体心脏标本肥大细胞类胰蛋白酶的免疫组化检测结果显示：（1）精神应激组、酒精组的冠脉外膜周围肥大细胞数量均明显多于对照组（P<0.05,P<0.05），两组之间无显著差异（P>0.05）。而在心肌间质中，两组与对照组之间的肥大细胞数量无明显差异（P>0.05）。（2）不论在心肌间质还是冠脉外膜周围，精神应激组、酒精组的肥大细胞脱颗粒率均明显多于对照组（P<0.01,P<0.01），酒精组与神经应激组之间无显著差异（P>0.05）。　　3、人体心脏标本肾素及AT1R的免疫组化检测:肾素及AT1R在对照组的冠脉及心肌间质中表达丰富，而在酒精组及精神应激组中，大部分病例表达缺失。经统计：①对照组肾素表达量明显多于酒精组与精神应激组（P<0.05,P<0.01）；②对照组AT1R的表达量明显多于酒精组与精神应激组（P<0.01,P<0.01）；③酒精组与神经应激组之间的肾素、AT1R的表达无显著差异（P>0.05,P>0.05）。　　4、Pearson相关分析:表明冠脉外膜周围肥大细胞的脱颗粒率越高，冠脉中肾素及AT1R的含量越低，存在显著负相关关系（P<0.01,P<0.01）。　　5、用APOE基因缺陷小鼠构建急性酒精中毒模型的心脏标本：（1）进行丽春红S/维多利亚蓝复合染色（P/VB特殊染色），对照组小鼠冠脉弹力纤维呈整齐波浪状弯曲，急性灌酒组87.5％的小鼠冠脉的弹力纤维被拉直；（2）进行甲苯胺蓝染色，进行统计分析得知，急性灌酒组的肥大细胞总数及肥大细胞脱颗粒率均较对照组多（P<0.01,P<0.01）；（3）肾素及AT1R在对照组冠脉及心脏小血管内皮细胞中的表达量多于急性灌酒组。　　结论：　　1、心脏中肥大细胞的数量增多，尤其是其活化率的增高，很可能是SCD发生过程中的一个重要环节。　　2、肾素及AT1R在SCD的发生过程中被大量消耗，提示肥大细胞可能是通过激活心脏局部的RAS系统来促进SCD的发生。　　3、肥大细胞数量、脱颗粒率的增多以及肾素、AT1R的消耗均以冠脉更为显著，因此冠脉可能是SCD发生发展过程中的关键部位。　　4、酗酒、争斗等不同应激，可能都通过肥大细胞脱颗粒，进而启动局部RAS系统来诱发SCD发生的，应激的来源可能并不是引发SCD的关键因素，而达到一定的刺激强度激活肥大细胞可能才是决定SCD是否发生的关键因素。