大蒜胚性细胞悬浮系的建立

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本文对大蒜胚性细胞悬浮系的建立进行系统的研究,其中对诱导大蒜胚性愈伤组织时外植体的确定、培养基的筛选及悬浮培养阶段细胞干鲜重变化、细胞个数变化等生理指标进行了研究。并对各个培养阶段愈伤组织进行石蜡切片,分析细胞形态结构和变化特点。结果表明: 1.适宜诱导大蒜胚性愈伤组织且生长正常的外植体为茎尖和根尖。最不适宜诱导胚性愈伤组织的外植体为保护叶片。 2.诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.5mg/L和MS+2,4-D2.0mg/L+KT0.5mg/L,茎尖和根尖在这两种培养基上的愈伤组织诱导为100%,且愈伤组织生长正常。 3.悬浮培养阶段细胞干、鲜重的测定结果表明,在培养前期细胞生长速度快,并于第15天达到峰值。然后细胞重量有所下降。细胞个数变化基本呈“S”形。 4.愈伤组织石蜡切片表明,具有胚性愈伤组织结构的细胞排列紧密,细胞核大,细胞质浓厚,细胞核随着继代次数的增加逐渐增大;非胚性愈伤组织的细胞排列疏松,细胞核小,细胞质稀薄。 5.再生能力测试表明,胚性愈伤组织再生能力强,非胚性愈伤组织再生能力弱,并且随着继代次数的增加逐渐减少以至消失。 6.细胞液pH值在培养前期变化大,随着培养时间的延长变化值逐渐减小。
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