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细胞周期的调控取决于一系列具有时相性变化的细胞周期调控因子，而这些周期调控因子的水平取决于相关基因的表达和蛋白自身降解两个方面。肿瘤的形成通常存在着细胞周期调控因子的异常，因此研究这些相关蛋白的降解对于明确肿瘤形成的机制及肿瘤治疗有着重要的意义。S期激酶相关蛋白2(S—phase kinaseassociated protein 2，Skp2)作为泛素化降解过程中一种F—box蛋白，在泛素化降解中起着特异性的底物识别和关键性的速率限制作用。p27kip1是广谱的细胞周期蛋白激酶抑制剂。依赖Skp2的泛素化降解途径参与P27kip1等众多细胞周期调控因子的降解，进而通过影响GI/S检测点而调控细胞周期。口腔粘膜鳞状细胞癌(oral squanlous cell carcinoma，OSCC)是头颈部最常见恶性肿瘤之一，阐明Skp2在OSCC发生发展中的作用，将有助于OSCC的早期发现、临床治疗和预后的评估。目前，国内外有关Skp2、P27kip1与口腔鳞状细胞癌关系的研究甚少。
通过免疫组化SP法检测p27kip1、Skp2蛋白在69例口腔鳞状细胞癌和12例正常口腔粘膜组织中的表达情况，并分析其与患者的年龄、性别、肿瘤的部位、临床分期、病理分级、颈淋巴结转移之间的相关性。实验发现口腔鳞状细胞癌中p27kip1蛋白的阳性率63.73％明显低于正常粘膜组织92.72％(P＜0.05)，Skp2蛋白在口腔鳞状细胞癌中的阳性率19.02％明显高于正常粘膜组织4.24％(P＜0.05)。p27kip1蛋白阳性表达率与肿瘤的临床分期、病理分级、颈淋巴结转移呈负相关(P＜0.05)，Skp2蛋白阳性表达率则与以上临床病理特征呈正相关(P＜0.05)；二者的阳性表达率与口腔鳞状细胞癌患者的年龄、性别、肿瘤部位无关(P＞0.05)。
p27kIP1蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达与Skp2蛋白呈负相关(P＜0.05)。Skp2蛋白表达与靶蛋白细胞周期抑制因子p27降解相关，可能参与了口腔鳞状细胞癌的发生、发展。联合检测p27kip1和Skp2蛋白表达有助于判断口腔鳞状细胞癌的恶性程度和预后。
通过应用skp2靶向的siRNA表达质粒转染skp2高表达的舌鳞状细胞癌(Tea8113细胞)后进行体内外研究，评价RNAi策略在肿瘤基因治疗中的可行性。采用真核转录质粒pRNAT—U6.1/Neo构建针对skp2基因的重组转录质粒skp2siRNA-1、skp2siRNA-2、skp2siRNA-3、skp2siRNA—4及阴性对照重组转录质粒skp2siRNA-NC(negative control)。经聚乙烯亚胺(PEI)法将其转染Tca8113细胞后，我们发现，转染skp2靶向的siRNA干扰质粒后的Tca8113细胞，skp2蛋白下调而p27蛋白上调表达。体外实验显示肿瘤细胞的生长受到了极大的抑制。此外，体内实验也证实转染skp2靶向siRNA干扰质粒后可明显抑制裸鼠移植舌鳞状细胞癌的生长。我们认为siRNA介导的skp2基因沉默显示明显的抗舌鳞状细胞癌作用，将可能成为skp2高表达肿瘤有效的基因治疗新途径。
研究结论：①skp2和p27基因在舌鳞状细胞癌细胞Tca8113中的分化增殖等方面所扮演的重要角色，这为以skp2基因为靶点的舌鳞状细胞癌基因治疗研究奠定了理论基础，但其临床应用还有待于进一步研究；②RNA 干扰是一种研究基因功能，发现及确定肿瘤治疗分子靶的有力工具。