结核病是一种全球流行的古老的疾病,由于其逃逸机制和耐药性常引起大面积暴发流行,并且以其高患病率、高耐药率,高死亡率和低递降率稳居第二致死性传染病。对结核病较有效的方法之一是通过具有免疫原性且无毒性的结核病疫苗-卡介苗进行疾病预防;另一类治疗方法为使用卡那霉素、链霉素、利福平和环丝氨酸等抗生素药物,但均产生一定耐药性。目前已经对结核分枝杆菌中的强毒菌株H37Rv菌株进行全基因组测序,但蛋白水平的研究还不全面。Rv1c蛋白为从H37Rv菌株中发现的一种新蛋白,它属于类原噬菌体元件φRv1中的一类,目前没有找到其同家族的蛋白,所以该蛋白的结构和功能研究匮乏。由于整个φRv1元件对病原菌的遗传物质整合至关重要,所以Rv1c蛋白在整合过程中也发挥着重要功能。合作者已鉴定出与Rv1c蛋白相互作用的一种激酶受体。本研究通过重组、酶切酶连和定点突变等分子生物学方法构建Rv1c基因、截短的Rv1c1-84基因以及激酶受体的大肠杆菌表达载体,用原核表达系统表达蛋白。通过亲和层析、离子交换和分子筛等纯化方法获得高纯度的三种目的蛋白。我们首先尝试通过Pull-down实验来验证激酶受体蛋白与Rv1c蛋白是否直接相互作用,但镍填料的对照实验结果显示Strep-Rv1c蛋白与镍填料会发生非特异性结合。而用Streptactin磁珠进行结合实验时未检测到相互作用。为进一步验证两者的相互作用,我们选用灵敏度更高的等温滴定热量法来验证,实验结果证明Rv1c蛋白和截短的Rv1c1-84蛋白均能与激酶受体蛋白相互作用。且Kd值分别为30 μM和49 μM,其相互作用能力一致。接下来通过结晶的方法获得性状较好的Rv1c1-84蛋白晶体,通过数据收集和处理获得1.24A高分辨率的蛋白结构。同时我们也将激酶受体蛋白与Rv1c蛋白混合进行晶体筛选,有结晶现象,并进行条件优化,晶体生长情况有所改善,但X射线衍射未能获得衍射数据。最后我们通过ZDOCK和Robetta获得预测的复合物结构,并推测出相互作用的区域。本研究通过实验证明Rv1c蛋白能够直接与激酶受体相互作用,并解析出了Rv1c1-84蛋白单体的结构。同时我们通过结构预测推断出相互作用区域,为接下来研究两者相互作用分子机制提供基础依据,为结核病治疗的提供了新的理论基础。