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目的：酶消化法分离毛乳头(dermal papilla DP)、真皮鞘细胞(dermal sheath cells DSC)，并进行体外培养，观察其体外生物学特性；利用分离的毛乳头、真皮鞘细胞观察体内和体外条件下它们诱导毛囊形成的能力，并建立体内及体外模型，探讨毛囊的生物学特征及毛囊形成过程中的影响因素。方法：利用酶消化法分别培养毛乳头细胞(dermal papilla cells DPC)、真皮鞘细胞等毛囊真皮成分细胞和表皮角质形成细胞（Epidermal Keratinocyte KC）、毛囊上皮细胞(hair keratinocyte hKC),然后将真皮成分细胞混合于复合壳多糖胶原凝胶中，待其在常温下凝固后，上面接种表皮角质形成细胞、毛囊上段上皮细胞，形成毛囊的体外三维培养模型，培养一月后，行病理切片、免疫组化观察毛囊形成情况。将刚分离的毛囊真皮成分细胞（毛乳头细胞、真皮鞘细胞）和表皮角质形成细胞、毛囊上段上皮细胞、毛囊球部细胞混合后移植入裸鼠皮下，或将毛乳头移植于裸鼠表皮下、真皮上，饲养8周后取材，行组织学检查观察毛囊形成情况。将毛乳头与角质形成细胞混合行二维和三维培养，观察二者之间的相互作用。将毛乳头（细胞）、毛囊真皮鞘细胞、真皮成纤维细胞(dermal fibroblast DFB)三者分别与角质形成细胞组合在复方壳多糖凝胶基质中行三维培养，比较三者收缩情况和对角质形成细胞分化的影响。结果：体外培养模型培养一月后能形成由细胞聚集形成的团状结构，角蛋白6（Keratin 6）染色阳性。毛乳头移植于裸鼠表皮下、原代毛囊真皮成分细胞和表皮细胞混合移植于裸鼠皮下8周后，组织学检查都能形成毛囊样结构。毛乳头与角质形成细胞混合二维培养时，毛乳头与角质形成细胞互相促进生长。三维培养时，毛乳头能诱导角质形成细胞在其周围形成细胞集落（克隆）。毛乳头（细胞）、毛囊真皮鞘成纤维细胞、真皮成纤维细胞三者均能促进角质形成细胞分化，使其在凝胶基质表面形成层状结构，三者引起凝胶基质的收缩能力基本相同，无明显的统计学差异。结论：1、我们采用低速、中速交叉离心的方法，提高了毛乳头的纯度，降低了毛乳头在离心过程中的丢失，且分离的毛乳头在24小时内贴壁可达100%；2、我们采用毛乳头亚器官冻存与复苏的方法，建立了 乳头（细胞）库；3、毛囊真皮鞘细胞在体外培养时出现了凝集生长的特性，且外形与新分离的毛乳头酷似，从一个侧面证明了真皮鞘细胞是体内毛乳头细胞的贮存库及源泉；4、毛乳头对角质形成细胞的生长有促<WP=8>进及制约作用，失去凝集生长特性的毛乳头细胞和真皮成纤维细胞及真皮鞘细胞一样，能够促进角质形成细胞的分化；5、体外毛囊三维重建能够形成K6染色阳性的细胞团，证明它具有向毛囊分化的倾向，为以后毛囊体外重建的成功指明了方向；6、毛乳头能够与自体及异体上皮细胞相互作用，在体内诱导毛囊形成。