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目的：学习记忆障碍是老年痴呆患者的主要临床表现，由于该病病因尚不十分清楚，目前从老年痴呆患者普遍存在脑供血不足事实，改善脑供血是其重要的治疗方法之一，而扩张脑血管，增加脑灌注，改善缺血区血氧供应，抑制血小板聚集，防止血栓形成，是目前治疗药物主要作用机制。基于天麻临床防治老年痴呆有效性的报导及我们前期天麻可通过抑制细胞外钙内流而阻止内钙释放[2]继而扩张平滑肌、抑制血小板聚集的作用的结论，我们推测天麻是通过阻止细胞外钙内流而扩张脑血管、抗血小板聚集，从血流动力学与血液流变学两方面增加脑供血而改善学习记忆。本研究从学习记忆的获得、巩固、再现三个方面对天麻进行学习记忆能力改善作用的评价。由于在我们前期的研究中被认为是天麻重要的活性成分天麻素并没有表现相同的药理活性，所以为进一步阐明天麻防治老年痴呆的物质基础、作用机制及其道地性，通过对三个天麻主产地(云南昭通、湖北宜昌、陕西西乡)的天麻采用HPLC法测定三产地天麻中天麻素的含量及抗血小板聚集作用的比较，对昭通天麻的道地性进行初步研究。
方法：1.三产地天麻提取物对兔血小板聚集作用影响采用比浊法，以二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集研究不同产地天麻提取物抗血小板聚集作用的差异。2.HPLC法对三产地天麻中天麻素的含量测定采用HPLC法测定三产地天麻中天麻素的含量，并对含量测定方法进行了方法学考察。色谱条件：Agilent TC-C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05％磷酸(4:96)；流速：1.0ml/min；检测波长：220nm。3.三种方法致小鼠记忆障碍模型的考察分别复制东莨菪碱、氯霉素、乙醇不同剂量致小鼠学习记忆障碍模型，用Morris水迷宫测定学习记忆成绩，以确定实验用记忆障碍模型给药剂量。4.云南昭通天麻总提物对三种方法致小鼠记忆障碍的行为影响分别复制东莨菪碱、氯霉素、乙醇致小鼠记忆获得、巩固、再现障碍模型，通过Morris水迷宫，测定其学习记忆成绩，评价天麻总提物对小鼠记忆障碍的影响。5.云南昭通天麻乙酸乙酯提取物对记忆获得障碍小鼠胆碱能系统的干预作用复制东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍模型，采取预防性给予天麻总提取物及天麻乙酸乙酯提取物，通过Morris水迷宫，测定其学习记忆成绩，同时测定乙酰胆碱含量，进一步阐明天麻防治老年痴呆的物质基础、作用机制。
结果：1.三产地天麻提取物对兔血小板聚集作用影响三产地的天麻乙酸乙酯萃取部分对ADP诱导的家兔体外血小板聚集均具有明显的抑制作用。云南昭通天麻IC50为3.25mg/ml，湖北天麻IC60为3.79mg/ml，陕西天麻IC50为4.13mg/ml。2.HPLC法对三产地天麻中天麻素的含量测定方法学考察得出：天麻素在20—200μg/ml的范围内具有良好的线性关系，相关系数r=0.9998；对照品溶液与供试品溶液在48小时内稳定，重现性良好，RSD=2.23％；平均加样回收率为97.93％，RSD为1.49％；样品测定结果RSD=1.66％。云南昭通、湖北宜昌、陕西西乡三产地天麻中天麻素质量百分含量分别为0.164％、0.263％、0.418％。3.三种方法致小鼠记忆障碍模型的考察三种记忆障碍模型复制成功。定位航行实验中，氢溴酸东莨菪碱1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg剂量组，乙醇20％、30％剂量组，氯霉素200mg/kg剂量组均使记忆障碍模型小鼠逃避平台潜伏期明显延长、搜索距离显著增加，与空白组比较P<0.01；在空间搜索实验中，氢溴酸东莨菪碱1mg/kg、2 mg/kg、3mg/kg剂量组，乙醇20％、30％剂量组，氯霉素200mg/kg剂量组均使记忆障碍模型小鼠在原平台所在象限搜索时间百分比及距离百分比明显减少，与空白组比较P<0.01。4.云南昭通天麻总提物对三种方法致小鼠记忆障碍的行为影响在定位航行实验中天麻总提物预防给药可对抗东莨菪碱引起的记忆获得障碍、氯霉素引起的记忆巩固障碍、乙醇引起的记忆再现障碍模型动物的逃避潜伏期明显延长、搜索距离明显增加，与空白组比较P<0.05；阳性药组、天麻总提物组逃避潜伏期、搜索距离均明显缩短，与模型组比较P<0.05。在空间搜索实验中，模型组在原平台所在象限的搜索时间和距离占总时间及总距离的百分比均显著下降，与空白组比较P<0.01；阳性药组、天麻总提物组在原平台象限时间百分比和距离百分比均显著增加，与模型组比较P<0.01。5.云南昭通天麻乙酸乙酯提取物对记忆获得障碍小鼠胆碱能系统的干预作用 (1)学习记忆行为在定位航行实验中，模型组逃避潜伏期显著延长，搜索距离显著增加，与空白组比较P<0.01；阳性药组、天麻总提物组、乙酸乙酯提取物低剂量、天麻素组逃避潜伏期、搜索距离均明显缩短，与模型组比较P<0.05；乙酸乙酯提取物高剂量组避潜伏期、搜索距离显著缩短，与模型组比较P<0.01；乙酸乙酯提取物高剂量组逃避潜伏期，与天麻素组比较P<0.01。在空间搜索实验中，模型组小鼠在原平台所在象限的搜索时间和距离占总时间及总距离的百分比明显下降，与空白组比较P<0.01；阳性药组、天麻总提物组、乙酸乙酯高剂量、乙酸乙酯低剂量、天麻素组在原平台象限时间百分比和距离百分比均显著增加，与模型组比较P<0.01。(2)乙酰胆碱含量氢溴酸东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠脑内乙酰胆碱含量显著下降，与空白组比较P<0.01；阳性药组、天麻总提物组、乙酸乙酯提取物高剂量、乙酸乙酯提取物低剂量均能显著提高小鼠脑内乙酰胆碱含量，与模型组比较P<10.01；天麻素组能明显提高小鼠脑内乙酰胆碱含量，与模型组比较P<0.05。
结论：1.云南昭通天麻的抑制家兔血小板聚集作用在三产地天麻中最强。2.云南昭通天麻中天麻素含量在三产地天麻中最低。3.氢溴酸东莨菪碱1mg/kg，氯霉素200mg/kg，乙醇20％的给药剂量可造成稳定的学习记忆障碍模型。4.云南昭通天麻总提物对东莨菪碱引起的小鼠记忆获得障碍、氯霉素引起的记忆巩固障碍、20％乙醇引起的记忆再现障碍有明显的改善作用。5.云南昭通天麻乙酸乙酯提取物能对抗乙酰胆受体阻滞剂东莨菪碱所致的学习记忆获得障碍，对模型小鼠空间学习认知损伤有保护作用，且能够提高小鼠脑内乙酰胆碱含量。