中美母亲母乳中性寡糖浓度差异及相关基因FUT2的多态性研究

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第一部分:中/美母亲母乳中性寡糖浓度差异性研究研究目的研究中国母亲母乳中性寡糖浓度以及产后不同时期母乳中性寡糖浓度变化规律及母乳中性寡糖Lewis分型。分析不同类型中性寡糖随时间在中性寡糖总量中百分比变化。通过与美国母亲母乳比较,发现两者之间产后不同时点母乳中性寡糖总量及各不同类型中性寡糖差异。研究方法本研究在中国上海选取符合入选标准的51对新生儿及母亲进入课题,分别在产后2,4,13周收集母亲单侧乳房全部母乳,2周时同时收取一份母亲唾液。美国母亲与中国母亲以同样标准筛选进入课题,美国同事按照同样收集方法在与中国母亲相同时点收集。采用高效液相色谱分析技术检测母乳中性寡糖浓度。结果1.中国母亲产后不同时点母乳中性寡糖比较:产后13周内母乳中性寡糖的总量虽然稳定,但是其中主要的三种成分浓度变化明显,3-FL浓度一直增加,分别由2周的84.6mg/ml增至485.8mg/ml(P<0.05),2’-FL的浓度由579.6mg/ml增至787.8mg/ml,LNF-1浓度则持续下降由596.9mg/ml降至304.5mg/ml。2.根据母乳中性寡糖分类,中国母亲的Lewis表型分型:根据母乳中性寡糖分类,29位母亲属于Le(a-,b+)型,10位母亲属于Le(a-,b-)型,12位母亲属于Le(a+,b-)型3.美国母亲产后不同时点母乳中性寡糖浓度比较:产后三个时点母乳中性寡糖总量下降,有显著性差异。LNF-1浓度随时间延长而降低,且不同时点浓度有显著性差异(P<0.05)。3-FL浓度变化趋势相反。2’-FL变化不明显。LDFH-1,LNF-2,LNF-4,LDFH-II在前13周内的浓度水平无明显变化4.中/美母亲母乳中性寡糖总量不同时点两两比较:美国母亲母乳中性寡糖总浓度在产后2,4,13周时都显著大于中国母亲。5.中/美母亲母乳α1,2连接中性寡糖不同时点比较:美国母亲母乳连接中性寡糖在产后2周时明显高于中国母亲;美国与中国母乳α1,2连接中性寡糖产后4,13周没有显著性差异。6.中/美母亲母乳α1,3连接中性寡糖不同时点比较:美国母亲母乳α1,3连接中性寡糖在产后2,4,13周都显著大于中国母亲。结论:1.中国母亲母乳中性寡糖在产后不同时点的变化有特异性,产后三个月内α1,3岩藻糖寡糖表达增加,α1,2岩藻糖寡糖总体表达水平不变2.美国母亲母乳中性寡糖浓度总体水平高于中国母亲;其中,α1,3,α1,4岩藻糖寡糖浓度远高于中国母亲,而α1,2岩藻糖寡糖两者却没有显著性差异。中国母亲α1,2岩藻糖寡糖在总中性寡糖中比例高于美国母亲。3.根据母乳分类确定的母亲Lewis基因型在研究人群中的分布与Lewis基因型在中国人群分布相似。第二部分:FUT2单核苷酸位点基因型多态性与中性寡糖浓度关系研究目的检测中/美两国母亲FUT2基因上的相关SNP位点基因型,探讨FUT2的SNP在中/美母亲中存在的基因多态性,并且比较母亲不同基因型与母乳中性寡糖含量之间的关系。研究方法用Oragene试剂盒收集中国51位母亲的唾液,保存在Oragene试剂盒中的唾液以标准流程提取DNA,测好浓度的DNA使用Taqman探针方法进行SNP位点的检测。结果1、美国母亲FUT2的SNP位点基因型分布:FUT2的SNP位点(rs601338)有A/G两者变异,分为AA,AG,GG三种基因型。51位美国母亲,12人为AA型,24人为AG型,15人为GG型。2、美国母亲SNP基因型与中性寡糖浓度关系:GG型母亲α1,2连接岩藻糖寡糖含量丰富,包括2’-FL,LNF-I,LNDFH-I;AA型母亲α1,2连接的岩藻糖寡糖少,而α1,3或α1,4岩藻糖寡糖丰富;AG型母亲岩藻糖基寡糖浓度介于两者之间。三种基因型母亲母乳中α1,2连接岩藻糖寡糖,α1,3或α1,4岩藻糖寡糖浓度存在显著性差异。3、中国母亲FUT2的SNP位点基因型分布以及与中性寡糖浓度关系:进行基因检测的50位中国母亲SNP位点(rs601338)基因型均为GG型,与中国母乳中性寡糖浓度变化没有明确关系。结论1、中/美两国母亲的FUT2的SNP位点(rs601338)存在基因多态性2、在美国母亲中,FUT2的SNP位点(rs601338)基因型与母乳不同中性寡糖浓度关系明确。3、在中国母亲中,FUT2的SNP位点(rs601338)基因型与母乳不同中性寡糖浓度关系不明确
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