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本研究以小麦蓝粒单体附加系为材料,构建了相关cDNA文库和抑制差减文库,并分离鉴定了一些与小麦蓝色胚乳表达相关的特异性cDNA序列,其目的是阐明小麦蓝色胚乳性状表达的遗传基础和发现相关基因。研究获得以下主要结果:1.利用蓝粒小麦未成熟种子mRNA构建了蓝粒相关cDNA文库,最终获得的未扩增文库约含1.2×10~6个克隆子;对部分文库扩增后获得的文库滴度约为2×10~9pfu/ml。2.构建了小麦蓝色胚乳表达相关基因的抑制差减文库,文库约含10000个克隆子,插入片段多集中在100-500bp之间,平均长度约300bp。3.筛选获得了16个阳性克隆子,序列分析发现:(1)9个cDNA序列在GenBank上能找到同源较高的相关序列,其中3涉及小麦醇溶蛋白基因序列、1个涉及小麦低分子量谷蛋白亚基,这些基因在小麦种子中一般表达较强,假阳性的可能性较大;另外5个cDNA序列可能分别涉及单氧化酶基因、丝氨酸蛋白酶抑制剂基因和与小麦籽粒硬度相关的基因序列,以及2个功能未知的小麦、水稻DNA序列,它们可能与蓝粒性状的表达有一定的相关性;(2)7个cDNA序列在GenBank上没有找到较为匹配的序列,分析认为这些序列可能与小麦蓝色胚乳性状的表达有关,而且没有相关的研究报道,可能涉及新的功能基因。4.对4个候选cDNA序列的表达特异性分析发现:与玉米P450单氧化酶基因相关的cDNA序列3及功能未知的cDNA序列15在蓝白粒未成熟种子间差异表达,在蓝粒未成熟种子中的表达明显增强,说明它们可能与蓝粒性状的表达相关;功能未知的cDNA序列14、16在蓝粒未成熟种子中特异性表达,可能代表了与蓝色胚乳表达高度相关的基因。